Bright Green Agar, Foundation, Preparation, bruker
- 1673
- 391
- Thomas Karlsen
Han Bright Green Agar Det er et solid kulturmedium, med høy grad av selektivitet. Det brukes utelukkende for isolering av stammer av slekten Salmonella; Imidlertid er det noen unntak, for eksempel tyfien og parathyphi -artene som ikke vokser i dette mediet.
Søket etter Salmonella -sjangeren er hyppig i avføring, vann eller matprøver. I denne forstand kan dette mediet være veldig nyttig. Denne agaren ble opprettet i 1925 av Kristensen, Lester og Jurgens, ble senere modifisert av Kauffmann.
Det er sammensatt av multiplayoner fra fordøyd dyrevevspeptisk og digreatisk kasein, inneholder også gjærekstrakt, natriumklorid, laktose, sukrose, fenolrød, lysegrønn og grep.
Det er preget av å være et ganske ugjestmildt medium for de fleste bakterier, og favoriserer veksten av Salmonella, men noen koliformer er i stand til å eksistere i det, utvikle seg svakt.
Det er viktig å fremheve at i dette mediet ikke vokser Shigella -sjangeren og heller ikke Salmonella typhimurium, ingen Salmonella paratyphi. Derfor, hvis du vil isolere disse mikroorganismer, bør andre medier brukes, for eksempel XLD -agaren, blant andre.
Basis
Bright Green Agar
Hver av komponentene som utgjør mediet, oppfyller en spesifikk funksjon som bestemmer egenskapene og egenskapene til agaren.
Pluipeptoner og gjærekstrakt er kilden til næringsstoffer der mikroorganismer tar nitrogen og mineraler som er nødvendige for deres utvikling. Laktose og sukrose er energikilder for mikroorganismer som er i stand til å gjære dem.
Lysegrønn er hemmerstoffet som forhindrer utvikling av gram -positive bakterier og et stort antall gram negative mikroorganismer.
Kan tjene deg: Troponin: Kjennetegn, struktur, funksjoner og testerNatriumklorid gir osmotisk stabilitet til miljøet. Mens den røde fenol er pH -indikatoren, er den samme fargeviren når du oppdager produksjon av syrer fra karbohydratfermentering.
Ikke -fermenterte kolonier av laktose og sukrose vokser i dette mediet av en hvit eller gjennomsiktig hvit farge, på en rød bakgrunn. For eksempel bakterier av salmonella -slekten.
Mens laktose eller sukrose gjærende bakterier som er i stand til å vokse i dette mediet, utvikler de gul eller gul gul farge, på en grønn gul bakgrunn. For eksempel, Escherichia coli og Klebsiella pneumoniae.
Bright Green Agar -varianter (BGA)
Det er andre varianter av den lysegrønne agaren; Bright Green Green Girvobiocin APAR (NBG) og strålende grådighet ble glicerol avocin laktose (NBGL).
Den lysegrønne Novobiocin -agaren glukose (NBG)
Den inneholder soyabønne soyabønne landbruk, jern ammonium citro.
Det brukes til å isolere Salmonella -kolonier fra avføringsprøver.
I dette tilfellet er de lysegrønne og Novobiocinene de hemmende stoffene som forhindrer vekst av gram -positive bakterier og noen gram negative mikroorganismer.
Natriumtiosulfat er svovelkilden og jernscitrat er jernkilden, både nødvendig for å avsløre produksjonen av hydrogensulfid gjennom dannelse av et svart bunnfall av jernsulfid.
Glukose er gjærbart karbohydrat og fenolrød er pH -indikatoren.
I dette mediet utvikler koloniene til Salmonella seg stort med et svart senter omgitt av en rødlig glorie og etterfulgt av et klart synlig område. Noen belastninger av Citrobacter Freundii produsere identiske kolonier som Salmonella.
Det kan tjene deg: Flora og Fauna av Durango: Representative arterStrålende glicerol grønn grønn avobiocin laktose glyserol (NBGL)
Dette mediet inneholder soyabønne soyabønner, jern ammoniumcitrat, natriumtiosulfat, laktose, glyserol, lysegrønn, novobiocin og destillert vann.
Forskjellen i dette mediet med forrige.
Mediet brukes også til å isolere Salmonella -arter, koloniene utvikler svart, ved produksjon av hydrogensulfid.
Bare kolonier som ikke produserer syre fra glyserol eller laktose, oppnår en H2Er tilstrekkelig, fordi pH under forstyrrer dannelsen av h2S. Dette resulterer i fargeløse kolonier for de fleste proteus- og Cytrobacter -arter.
Forberedelse
-Vei 58 gram av det dehydrerte mediet oppnådd kommersielt. Tilsett det i en liter droppet vann. Bland, la stå i noen minutter og sende forberedelser til en varmekilde til den oppløses helt.
-Autoklav ved 121 ° C i 15 minutter, ikke overskrider steriliseringstid.
-La stå og servere fortsatt varmt på petrisk sterile plater. Den endelige pH må være 6,9 ± 0,2.
-La stivne og spare i kjøleskapet til bruk. Før jeg så platene, må de ta romtemperatur.
-Pulveret er grønt og tilberedt tar en oransjebrun eller rødgrønnaktig farge, avhengig av pH og kommersielt hus. En veldig brun farge er en indikasjon på at agaren ble overopphetet.
-Når agaren ikke er anbefalt, anbefales det ikke å gjenopprette, fordi mediet forverres.
Bruk/applikasjoner
Dette mediet brukes til søket etter stammer av slekten Salmonella -prøver av avføring og meierimat, blant andre.
Kan tjene deg: fosfatidilserin: struktur, syntese, funksjoner, beliggenhetÅ være et ganske ugjestmildt middel, anbefales det å så en rik inokulum hvis den direkte prøven brukes. Ellers bør forhåndsberikelse og berikelse av prøver gjøres før jeg så i dette mediet.
Ettersom noen Salmonella -stammer blir hemmet eller vokser med vanskeligheter, anbefales det å følge dette mediet med andre selektive aldre for Salmonella.
Hver koloni med en typisk Salmonella -karakteristikk må utsettes for biokjemiske tester for definitiv identifikasjon.
QA
For å teste riktig funksjon av den lysegrønne agaren. ATCC -stammer kan brukes til å observere deres utvikling på den.
De hyppigste stammene som brukes til kvalitetskontroll er: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922, Shigella Flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.
De tre første må gi rosa eller gjennomsiktige hvite kolonier på rød bakgrunn. Salmonella med god utvikling og proteus med knapp eller regelmessig vekst.
For Klebsiella og Escherichia forventes det at det forventes grønne gule kolonier med gul bakgrunn, og i tilfelle av Shigella og Staphylococcus må de bli hemmet.
Det dehydrerte mediet må lagres ved romtemperatur, på et tørt sted, fordi mediet er veldig hygroskopisk.
Referanser
- Britania Laboratory. Bright Green Agar.
- BD Laboratory. BD strålende grønn agar.