Baird Parker Agar hva er, grunnlag, forberedelse, bruk

Han Baird Parker Agar eller eggeplomme -agar er et solid, selektivt og differensialkulturmedium. Det ble opprettet i 1962 for påvisning og telling av positiv koagulase -stafylokokker (Staphylococcus aureus).

Det er sammensatt av pankreas kasein hydrolysert, kjøttekstrakt, gjærekstrakt, litiumklorid, glycin, natriumpyruvat, kaliumteluritt, grep og eggeplomme -emulsjon.

Typiske kolonier av Staphylococcus aureus i Baird Parker aldring. Kilde: Daizy John [CC av 4.0 (https: // creativecommons.Org/lisenser/av/4.0)]

Baird Parker Agar er basert på kapasiteten til S. aureus for å redusere telurito og produsere lecithinase. Begge egenskapene genererer en koloni med spesifikke egenskaper for denne arten. Derfor gir det stor effektivitet i påvisning av denne mikroorganismen.

De typiske koloniene til S. aureus De er svart eller mørkegrå, med fargeløs kant og en klar glorie som omgir dem, og skiller seg fra resten av mikroorganismer. Dette patogenet kan finnes i kliniske prøver, vann, kosmetikk og rå eller kokt mat.

Diagnosen eller deteksjonen er av største betydning, på grunn av mangfoldet av patologier den produserer, for eksempel matforgiftning, skåldet hudsyndrom, giftig sjokksyndrom, abscesser, hjernehinnebetennelse, septikemi, endokarditt, blant andre.

Basis

Ernæringskraft

Kasein pankreas hydrolysert, kjøttekstrakt og gjærekstrakt er kildene til næringsstoffer, vitaminer og mineraler som er nødvendige for mikrobiell generell utvikling, mens pyruvat og glycin er forbindelser som favoriserer den spesifikke veksten av Staphylococcus aureus.

Selektiv

Baird Parker Agar er selektiv fordi den inneholder stoffer som hemmer veksten av den medfølgende floraen, samtidig som den favoriserer utviklingen av S. aureus. Inhiberende forbindelser er litiumklorid og kaliumfortelling.

Differensial

Dette mediet tillater å differensiere S. aureus av resten av den negative koagulase -stafylokokken. S. aureus Den har evnen til å redusere teluritten til svart metallisk teluro, og danner svarte eller mørkegrå kolonier.

På samme måte gir eggeplommen underlagene for å demonstrere tilstedeværelsen av lektinasen og Lipasa -enzymet. S. aureus Det er positivt lecitinase, og derfor vil en klar glorie bli observert rundt kolonien, noe som indikerer at lecithin ble hydrolysert.

Kan tjene deg: Gill -pust: Hvordan det gjøres og eksempler

I denne forstand er utseendet i denne svart eller lyse svart eller grå -gray kolon S. aureus. 

Hvis det dannes en nedbørsson. Noen belastninger av S. aureus De er positive og andre negative lipase.

I tilfelle at S. aureus Vær en positiv lipase Et ugjennomsiktig område vil bli observert rundt den svart eller mørkegrå kolonien, og deretter den klare glorie for handling av lecitinasen.

Koloniene til andre bakterier enn S. aureus i stand til å vokse i dette mediet vil de utvikle fargeløse eller brune kolonier, uten glorie rundt.

Du kan også observere atypiske svarte kolonier med eller uten fargeløs kant, men uten lys glorie. Disse koloniene skal ikke tas i betraktning, de samsvarer ikke med S. aureus.

Forberedelse

Eggeplommeemulsjon

Et kjølig kyllingegg er tatt, vandret godt og plasserte 2 til 3 timer i 70% alkohol. Deretter åpnes egget aseptisk og skiller nøye den lyse i eggeplommen. Deretter blir 50 ml eggeplommen tatt og blandet med 50 ml steril fysiologisk løsning.

1% P/V kalium Tellto

Noen kommersielle hus selger 1% poetassium Teluro klar til bruk. Det legges til mediet før midlene stivner.

For å forberede denne løsningen i laboratoriet, 1.0 gr kaliumtelling og oppløses i en del av vannet. Deretter er vannmengden fullført til den når 100 ml. Løsningen må steriliseres ved filtreringsmetoden.

Utarbeidelse av kulturmedium

Vei 60 gr dehydrert medium og oppløs i 940 ml destillert vann. La hvileblandingen ligge i omtrent 10 til 10 minutter.

Det kan tjene deg: Interspesifikke forhold: Typer og eksempler

Påfør varme omrøring av miljøet ofte for å forbedre oppløsningsprosessen. La koke et øyeblikk. Sterilice i autoklav ved 121 ° C i 15 minutter.

La stå til den når en temperatur på 45 ° C og tilsett 50 ml av eggeplommeemulsjonen og 10 ml 1% teluritt. Bland godt og server mellom 15 til 20 ml på petrisk sterile plater.

La størkne, bestille i en omvendt i platere og lagre i kjøleskap til bruk.

Den endelige pH i det fremstilte mediet må være 6,8 ± 0,2.

Før du så en prøve, bør du vente på at platen tar temperaturen i miljøet. Så plakkene på grunn av stigende eller overflate plantet med Drigalski -slikkepott.

Fargen på det dehydrerte mediet er stekt og fargen på det tilberedte mediet er lett rav.

Bruk

Kliniske prøver

Kliniske prøver blir sådd direkte ved å slippe ut en del av materialet i den ene enden av platen, og derfra skilte de seg ut på grunn av utmattelse. Inkuber i 24 til 48 timer ved 35-37 ° C.

Matprøver

Vei 10 gr av matprøven og homogeniserer i 90 ml 0,1%Peptonada -vann, derfra tilbereder de fortynninger om nødvendig. Inokulere plakettene i tre eksemplar. Det er incuba i 24 til 48 timer ved 35-37 ° C.

Denne metodikken lar deg telle de typiske koloniene som er oppnådd og er ideell når tilstedeværelsen av S. aureus over 10 UFC per gr/ml prøve.

Hvis det mistenkes at mengden av S. aureus Det er lite eller det er mye medfølgende flora, foreslås det. Dette vil favorisere veksten av S. aureus og hemmer utviklingen av den medfølgende floraen. Tuft -rørene blir sådd i Baird Parker Agar.

Kan tjene deg: Hvordan kjennes levende organismer fra miljøet vårt?

Vannprøver

I et vakuum og sterilisert filtreringssystem filtreres 100 ml vann som undersøkes, og deretter fjernes 0,4 mikroporøs membran med en steril klemme og plassert på en Baird Parker -plate. Det er incuba i 24 til 48 timer ved 35-37 ° C. Denne teknikken lar de typiske koloniene stole på S. aureus.

QA

For å evaluere kvaliteten på Baird Parker Agar, kan kjente stammer brukes, for eksempel Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

I tilfelle av stammer av S. aureus ATCC er kjent for å redusere teluritt, og de er positive lipase og lecithinase. Derfor må det være en tilfredsstillende utvikling og vokse konvekse kolonier med svart sentrum og fargeløs kant, med en ugjennomsiktig glorie og en annen mer ytre glorie klar.

For sin del, av S. epidermidis Dårlig utvikling forventes i dette mediet, med grå kolonier som forteller til svart, uten en klar glorie.

Til OG. coli og P. Mirabilis Det forventes å bli helt eller delvis hemmet. I tilfelle voksende brune kolonier uten ugjennomsiktig sone, eller klar glorie.

Anbefalinger

-Mediet skal ikke varmes opp etter å ha tilsatt telurito og eggeplomme.

-Utarbeidelsen av eggeplommeemulsjon og dens aggregat i midten er et veldig sårbart forurensningstrinn. Det må gjøres forsiktighet.

-Hvis det er tilstedeværelse av typiske kolonier av S. aureus Det må bekreftes ved å ri på en koagulasetest til nevnte belastning.

-Hvis det er tvilsomme resultater med koagulase, må andre bekreftende tester monteres.

-Vær forsiktig så du ikke forveksler tilstedeværelsen av typiske kolonier av S. aureus Med de atypiske svarte koloniene.

Referanser

1. BD Laboratories. Baird Parker Agar. Tilgjengelig på: BD.com
2. Laboratories Francisco Soria Melgizo. Baird Parker Agar. Tilgjengelig på: http: // f-soria.Det er/informere