Selenito buljong hva er, fundament, forberedelse, bruker

Han Selenito buljong Det er et selektivt flytende kulturmedium. Det ble designet av Leifson for berikelse av prøver der tilstedeværelsen av enteropatogene bakterier i slekten Salmonella er mistenkt.

Dette mediet oppfyller kravene fra American Public Health Association (APHA), og blir derfor akseptert for etterforskning av Salmonellas tilstedeværelse i avføringsprøver, urin, væske eller fast mat, vann, blant andre.

Selenito buljong. Kilde: Foto tatt av MSc -forfatteren. Marielsa Gil

Den kjemiske sammensetningen som den har favoriserer utvinning av disse mikroorganismer og på sin side hemmer andres vekst. Det er hovedsakelig giftig for de fleste bakterier som tilhører enterobacteriae -familien. Imidlertid tillater det også utvinning av Shigella -stammer og hemmer ikke veksten av Pseudomonas og Proteus.

Det er sammensatt av vannfritt natriumhydrogen, vannfri natriumfosfat, peptonas og laktose. Det er også en variant som Cistina er lagt til, derav navnet hennes Selenito-Cistina-buljong.

For tiden er bruken av selenito-cisine buljong foretrukket, siden en høyere prosentandel av Salmonella-utvinning tilsvarer den som observeres med andre selektive midler med samme formål oppnås, slik som natriumtetrasjonsbuljong.

Basis

Peptonene som er i buljongen fungerer som næringsstoffer for god utvikling av mikroorganismer. Salmonella -stammer bruker peptoner som en kilde til nitrogen, vitaminer og aminosyrer.

Laktose er gjærbart karbohydrat, mens natriumselenitt er hemmerstoffet som bremser veksten av gram positive bakterier og de fleste bakterier som er til stede i tarmfloraen, spesielt enterobacteriae -familien. Natriumfosfat er støtdemperen som stabiliserer medium pH.

Kan tjene deg: Chemiosteat: Kjennetegn, historie og bruk

Når det.

Forberedelse

-Selenito buljong

Hvis du har komponentene i blandingen, kan du veie:

4 GR av vannfritt natriumhydrogen.

10 gr vannfritt natriumfosfat.

5 GR av PEPTONES.

4 gr av laktose.

Løs sammen forbindelsene i 1 liter sterilt destillert vann. Det kan varmes litt opp for å løse opp i sin helhet.

Noen laboratorier utsetter mediet i 10 minutter i fluente damp for å sterilisere det, siden autoklave ikke skal brukes. Hvis mediet er sterilisert, kan det lagres i kjøleskap til dets bruk.

Det kan også tilberedes uten å sterilisere og servere 10 til 15 ml til sterile testrør.

I dette tilfellet bør du la stå og bruke umiddelbart. Siden mediet ikke er sterilt, kan det ikke lagres i kjøleskap for senere bruk.

-Kommersiell medieforberedelse

Hvis det kommersielle mediet er tilgjengelig, 23 gr av det dehydrerte mediet og oppløst i en liter sterilt destillert vann. Kort oppvarme for å fullføre oppløsningen. Ikke steriliser i autoklave. Senes aseptisk 10 eller 15 ml i sterile testrør.

Den endelige pH i mediet må være 7,0 ± 0,2.

Det skal bemerkes at fargen på det dehydrerte mediet er beige og preparatet er klar og gjennomskinnelig rav.

Selenito-cisine buljongvariant

Den inneholder de samme selenittbuljongforbindelsene, men 10 mg cystina tilsettes. Resten av prosedyren er nøyaktig den samme som beskrevet ovenfor.

Kan tjene deg: parafiletisk gruppe

applikasjoner

Dette mediet er spesielt å brukes i epidemiologiske studier, i tilfeller der sykdommen ikke er i det akutte stadiet, asymptomatiske pasienter eller friske bærere.

Isolasjonen av kjønnssalmonellaen er vanligvis vanskelig, siden de normalt forurenser prøvene på en kort måte. Å være i en nøtt.

På den annen side blir råstoffet som behandlet mat ofte tilberedes utsatt for varme, dehydreringsprosesser, bruk av desinfeksjonsmidler, stråling og konserveringsmidler, blant andre.

Derfor blir Salmonellas som er til stede i råstoffet mishandlet ved innsending av produktet til de nevnte industrielle prosessene. På samme måte, når det gjelder kliniske prøver som avføring, kan stammer være svake hvis de kommer fra pasienter som har blitt behandlet med antibiotika.

Derfor må en hvilken som helst prøve mistenkt for tilstedeværelsen av Salmonella være før berikelse i laktosadobuljong, og deretter beriket i selenito -buljong for å optimalisere hans utvinning i det selektive mediet, som SS Agar, Xilosa Agar, de -xicolate lysin (xld) , HokToen Enteric (He) og Green Apar -Brillante, blant andre.

Sådd

For avføringsprøver, ta 1 gr -prøve og suspenderer i et rør med 10 til 15 ml selenito buljong. Hvis avføringen er flytende, ta 1 ml og suspenderer buljongen. For rektal vattpinner, last ned vattmaterialet i buljongen.

I fast matprøver tar du 1 gr og suspenderer Selenito -buljongen.

I flytende mat blandes i like deler med dobbel konsentrasjon selenittbuljong.

Kan tjene deg: halluseni

For urinprøver må du sentrifuge, kaste supernatanten, ta alt sedimentet og suspendere den i Selenito -buljongen.

Buljongene ved 37 ° C blir inkubert i 24 timers inkubasjon. Bakteriell vekst fremgår av turbiditet. Et ekstra rør per prøve kan også inkluderes for å inkubere 42 ° C. Deretter sår selektive solide medier fra Selenito -buljongen.

QA

For sterilitetskontroll inkuberes 37 ° C i 24 timer en selenito -buljong av hvert parti uten å inokulere. Det forventes at det ikke er noen turbiditet, ingen middels fargeendring.

For å kontrollere riktig funksjon av medium, kan kjente stammer brukes, for eksempel:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella Choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 og Proteus mirabilis ATCC 43071.

De forventede resultatene er:

• For de tre første bakteriestammene må veksten være tilfredsstillende.
• Til Escherichia coli Delvis hemming.
• For proteus moderat vekst.

Begrensninger

Halv -seleenito -buljongen er giftig for menneskets hud, derfor bør direkte kontakt unngås.

Referanser

1. Britania Laboratories. Selenito buljong. Tilgjengelig på: Britanialab.com
2. Neogen Laboratories. Selenito buljong. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen.com