Xantoproteic Reaction Foundation, prosedyre, bruk

De Xantoproteisk reaksjon Det er en kjemisk prosedyre som brukes for å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av aromatiske aminosyrer, for eksempel tyrosin og tryptofan, som kan være frie eller konstituerende oppløselige proteiner, peptider eller polypeptider.

Det har også blitt brukt til å oppdage giftige stoffer på blodnivået som inneholder en beancen -gruppe i strukturen. Denne testen er også kjent som Becher Xantoproteic -reaksjon.

Positiv xantoproteisk reaksjonskilde: hentet fra video: https: // youtu.Være/gzgmbw5w4wo

Xantoprote -reaksjonen bruker konsentrert salpetersyre, varme og en nøytraliserende alkali. Hvis den gule til oransje løsningsløsningen, når man nøytraliserer reaksjonen, anses som positiv. Den observerte fargen skyldes dannelsen av nitrogenforbindelser avledet fra nitrifiseringen av benzeniske grupper.

Hvis du trenger å kvantifisere mengden totale proteiner, er det nødvendig å bruke andre proteinbestemmelsesmetoder, for eksempel Biuret.

Den xantoproteiske reaksjonen brukes hovedsakelig når stoffer blir analysert som den kjemiske sammensetningen ikke er kjent. Generelt er denne reaksjonen en del av et sett med tester som vil bidra til å bestemme den kjemiske sammensetningen av et spesifikt stoff eller ekstrakt. Det er grunnen til at det brukes mye av forskere.

På den annen side brukes Bechers Xantoproteic -reaksjon for å oppdage fenoliske og indoliske stoffer i blodet, og er mulig for å forutsi utseendet til nefropati, før andre flere parametere økes.

[TOC]

Basis

Reaksjonen oppdager i utgangspunktet tilstedeværelsen av den benzeniske gruppen, begge i aminosyrer, som i proteiner og peptider. Salpetersyre virker på aminosyren Bencenic Ring som har den, og danner fenoliske nitrokomposisjoner.

Reaksjonen trenger varme som skal utføres, dannes vanligvis et bunnfall som skyer mediet, noe som gjør det til melkeaktig. Bunnfallet kan være hvitt eller gult. Til slutt krever det et alkaliseringstrinn som fremhever farge. For dette brukes en base som 40% eller ammoniakk natriumhydroksyd.

Reaksjonen vil bli tolket som positiv hvis en sterk gul farge blir observert under den mørke oppvarmingen eller oransje prosessen ved å alkalisere reaksjonen. Aminosyrene som er oppdaget er hovedsakelig tyrosin og tryptofan.

Xantoproteisk reaksjon. Kilde: http: // esteroisomeras.Blogspot.com/2013/06/karakterisering av proteiner.Html

Når det.

Kan tjene deg: Polaritet (kjemi): Hva er definisjon, eksempler

Generelt kan Xantoproteic-testen kompletteres med Hopkins-Cole-testen, som tjener til å identifisere triptofan spesifikt. Hvis den xantoproteiske testen er positiv og Hopkins-Cole er negativ, blir tilstedeværelsen av tryptofan kastet i den løsningen, noe som fører til tilstedeværelsen hovedsakelig av tyrosin. På samme måte kan det også kompletteres med Millons reaksjon for tyrosindeteksjon, blant annet.

Denne reaksjonen kan også brukes på blodprøver, plasma eller uendret serum for diagnose av uremi eller nyreinsuffisiens. I dette tilfellet er det som blir søkt påvisning av giftige stoffer (fenol og indolisk) produsert fra tarmrot.

Disse stoffene har den benzeniske gruppen og gir derfor en positiv xantoproteisk reaksjon, selv om de reaksjonære stoffene verken er en aminosyre eller et protein.

Fremgangsmåte

- Xantoprote reaksjon for aminosyredeteksjon med aromatiske grupper

Plasser 1 ml av problemprøven i et rent og tørt testrør.

-Tilsett 0,5 ml konsentrert salpetersyre.

-Inkuber blandingen i et bad på 70 ° C i 2 minutter. Forbered tidligere Maria -badet ved den nevnte temperaturen.

-Når du tar røret fra Maria -badet, er det mulig å observere at løsningen har blitt melkeaktig og har tatt litt gulaktig hvit farge.

-Løsningen avkjøles ved å slippe kaldt vann ved bunnen av røret.

-Forberedelsen påstås av sakte (dråpe for dråpe) en 40% natriumhydroksydløsning til det er et fargesjokk.

-Hvis testen er positiv, vil en mørk oransje ring bli dannet i væskegrensesnittet.

-Hvis reaksjonen er negativ, vil det ikke være noen fargedannelse.

- Xantoprote reaksjon for å oppdage fenoliske og indoliske stoffer i blodet

-Dispens 5 cm3 trikloreddiksyre ved 20% over 5 cm3 venøst ​​blod, plasma eller serum, hvor sistnevnte er den mest indikerte. Bland godt og filtrer.

Kan tjene deg: salpetersyre (HNO3)

-2 cc av filtreringen tas og blandes med 0,5 cm3 salpetersyre. Deretter blir den oppvarmet til koking, for dette plasseres røret direkte på flammen på lighteren i 30 sekunder. Avkjøles med vann og tilsett 1,5 natriumklorid ved 33%.

Det tolkes som følger:

-Negativt resultat: gulaktig farge.

-Positivt resultat (+) sitronsult.

-(++) Gullgul.

-(+++) Mørk gul til brun

Det kan også tolkes ved hjelp av en referanselig kolorimetrisk skala fra Auenrieth, sammensatt av forskjellige konsentrasjoner av kaliumbikromato. Dette er fremstilt i fortynninger på 10 av 10 fra en morsløsning på 0,03874%. Hvert rør representerer en prosentandel.

Tolkningsskala

Det er to tolkningsskalaer som kalles eldgamle og moderne. De normale verdiene er:

Gamle bord: mellom 75 og 85%

Moderne tabell: Mellom 15 og 25%

Hvis fargen på problemrøret er i midten av to mønsterrør, blir det gjort et gjennomsnitt mellom begge tiltakene.

Kaliumdikromatmønsterløsningen er fremstilt som følger: 7 måles.9 ml kaliumdikromat ved 10 N og er i flukt opp til 100 ml i en aggorado ball. For fortynninger følges det som det er vist i den kolorimetriske tabellen til Autenrieth.

Colorimetric Table of Autenrieth. Kilde: Vásquez a. Xantoproteisk reaksjon. Spansk klinisk magasin. 1949; 35 (5): 326-327. Tilgjengelig på: Elsevier

Bruk

Bruken av xantoprotisk reaksjon er en del av et sett med biokjemiske tester som hjelper til med å kjenne den kjemiske sammensetningen av et ukjent stoff. Denne testen bidrar til den kjemiske analysen påvisning av proteiner som inneholder benzeniske grupper i deres struktur.

Denne reaksjonen er mye brukt av forskere i forskjellige stoffstudier.

I denne forstand brukte Vásquez-Jorge og samarbeidspartnere denne og andre reaksjoner for å undersøke proteininnholdet i væsker hentet fra mangrove ostion (Crassostrea Rhizophorae).

På samme måte brukte Rojas og samarbeidspartnere (2009) en serie tester, blant dem er den xantoproteiske reaksjonen, for å analysere glycomacropéptides i presipitater av Lactosueros de ricotta.

På den annen side ble Bechers Xantoproteic -reaksjon modifisert av Volhard som skal brukes til andre formål. I dette tilfellet, for påvisning av fenoliske og indoliske stoffer som kan heves mye tidligere (uker eller måneder) at nivåene av urea og gjenværende nitrogen i blod økes.

Det kan tjene deg: Cerio: Struktur, egenskaper, innhenting, bruk

Dette giftige avfallet dannes fra tarmroten av mat.

Disse stoffene akkumuleres i blodet når de ikke blir eliminert ordentlig, derfor kan en positiv xantoprotisk test forutsi den hurtige etableringen av nyresvikt i seg selv eller en tilstand av uremi.

I henhold til fargeintensitet kan du bestemme hvor avansert det er. I dette tilfellet er testen kvantitativ.

Hos friske mennesker gir denne testen en svak gul farge, tilsvarende de normale nivåene av tryptofan og tyrosin som kan være i blodet.

Mens, hos nyrepasienter.

Forholdsregler

Denne testen må utføres av trente fagpersoner. Alle standarder for biosikkerhet bør vurderes, fordi reagensene som brukes er syrer og etsende baser.

Hvis noen få dråper salpetersyre på huden eller neglene faller, vil de bli gule, siden begge strukturer inneholder proteiner. I tillegg, på huden og slimhinnen, forårsaker det alvorlige forbrenninger.

Hvis det oppstår en kontakt med huden, må protokollen som følger være å vaske området umiddelbart med såpe og vann i omtrent 20 minutter.

Hvis du spruter øynene, må du vaske med mye ferskvann og prøve å holde øynene åpne.

Referanser

1. "Xantoproteica -reaksjon" Wikipedia, gratis leksikon. 2. september 2019, 17:49 UTC. 21. oktober 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge og, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge og. Fysisk -kjemisk karakterisering og proteininnhold av væskeekstrakter av mangrove ostion (Crassostrea Rhizophorae). Kubansk kjemi, 2014; 26 (1): 66-74. Tilgjengelig i redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Isolering og ytelse av GMP ved laktosuero nedbør med trikloreddiksyre. Forsker. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Tilgjengelig på: VE.Scielo.
4. Vásquez a. Xantoproteisk reaksjon. Spansk klinisk magasin. 1949; 35 (5): 326-327. Tilgjengelig på: Elsevier
5. Gálvez I, Gárate eller. Becher og Andrewes reaksjoner i urinoperasjon. Spanish Hospital Urology Service. Argentine Magazine of Urology 395-404