Kongo røde egenskaper, forberedelser og applikasjoner

Han Kongo rød Det er et protein azoisk fargestoff, dannet ved kobling av et diazoniumsalt og en aktiv aromatisk ring. Dette stoffet er i stand til å absorbere elektromagnetisk stråling i det synlige spekteret, og det er derfor det presenterer en intens farge.

Det er negativt ladet. Derfor har den en tilhørighet til positivt belastede cellekomponenter, som visse proteinstoffer. Fargen varierer i henhold til pH. I denne forstand, hvis mediet er syre (pH 5.2, er fargen intens rød.

Rød dehydrert og kolloidal løsning av Kongo. Kilde: Pixinio.com og wikipedia.com

Det er et veldig allsidig stoff, siden det har flere verktøy. Det har blitt brukt som fargestoff i tekstilindustrien, og også for celler og vev.

Også for å utføre kulturmedier som måler enzymatisk virkning, som en pH -indikator, som et kontrollstoff i evalueringen av riktig funksjon av spektofotometre, i studiet av biofillerdannelse, eller i diagnosen amyloider.

På samme måte har det tillatt å skille bakterie- og sopp serotyper ved identifisering av spesifikke strukturer i veggen (lipopolysakkarider).

[TOC]

Kjennetegn på Kongo rød

Dette stoffet ble oppdaget av Böttiger i 1884. Det er et diazoniumderivat dannet av bis-diazoisk av benknin med naphtionic acid. Det røde molekylet i Kongo måler 21 Armstrong og molekylvekten er omtrent 8000 g/mol.

Kongo rød er preget av å være oppløselig i vann, og enda mer i organiske løsningsmidler som etanol, og danner en kolloidal løsning.

Den har en affinitet for cellulose, av amyloidvevet og ved positivt belastede cellekomponenter.

Forberedelse

Kongo rød er fremstilt i forskjellige konsentrasjoner avhengig av teknikken som skal brukes. De fleste bruker Kongo rød til 1%, 2%, 0,1%, blant andre.

For eksempel, for å fremstille 2% Kongo Kongo, må for eksempel veie 2 g dehydrert fargestoff og tilsette 100 ml destillert vann. Så lagres den i en ravflaske.

applikasjoner

Som fargestoff i tekstilindustrien

En stund ble det mye brukt i tekstilindustrien på grunn av fiksering i bomull, men det er for øyeblikket nedlagt fordi den er kreftfremkallende og også fordi fargen ikke er stabil, og misfarges gjennom friksjonen.

Kan tjene deg: Chimotripsin: Kjennetegn, struktur, funksjoner, virkningsmekanisme

Bestemmelse av dannelseskapasiteten til biofilmer

Det er vist at mikroorganismen biofillerformasjonskapasitet er en virulensfaktor.

I denne forstand brukes Kongo Red -fargestoffet som en metode for å bestemme dannelse av biofilm. Kongo rød binder seg til eksopolisakkaridene som er til stede i biofilmen. Sammenlignet med andre metoder anbefales det minst av de høye falske negativene som oppstår.

Metoden bruker Kongo Red Agar, denne er sammensatt av blodagar som base, glukose (10 g/l) og Kongo -rødt fargestoff (0,4 g/l). Stammene som skal evalueres blir sådd i midten og inkuberes i 24 timer til 37 ° C, og deretter inkubert i 48 timer ved romtemperatur.

En positiv test er bevist hvis krystallinske kolonier av svart og tørt utseende blir observert.

Spektofotometre kvalitetskontroll

For å evaluere om absorbans- eller behandlingsmålingsutstyr er i samsvar med de fotometriske parametrene som er fastsatt ved internasjonale forskrifter, kan en enkel teknikk utføres som gjør det mulig å fastslå om utstyrets problemstillinger resulterer innenfor akseptabilitetsområdene.

En av evalueringsteknikkene er å bruke Kongo Red, basert på isosbet -punktet.

Det kalles isosbetisk punkt til bølgelengden som Kongo Red avgir den samme absorbansen uavhengig av pH, konsentrasjon og temperatur. Absorbansverdien er fast og kan brukes som referanse.

Det er kjent at det teoretiske isosbhetiske punktet til Kongo rødt er 541 nm. Hvis verdien som er oppnådd er forskjellig, er det kjent at utstyret presenterer problemer med bølgelengdeskift, og må gjennomgås av en spesialisert tekniker.

Utarbeidelse av kulturmedier

Ortiz og samarbeidspartnere beskriver et kulturmedium tilberedt med Kongo rødfarging og karboksymetylcellulose kalt CMC Agar, for å oppdage cellulittmikrobielle stammer; Det vil si cellulære produsenter (endogluconese, exoglucanase og ß-glucosidase).

Dette mediet har en intens farge. Fargen vil bli spredt ved virkningen av endoglucanase -enzymet som bryter strukturen til karboksymetylelulose. Dette antyder en positiv reaksjon.

Kan tjene deg: Fixistteori: konsept, postulater og forfattere

Nedgangen i viskositet og absorbans tillater kvantifisering av enzymaktiviteten. For eksempel i stammer av Streptomyces sp.

Identifisering av mikroorganismer

Kongo rød har affinitet for polysakkaridstrukturer av visse stammer, og oppnår identifisering av disse mikroorganismer. Blant dem er Escherichia coli, og Shigella Flexneri.

Kongo røde agarplater brukes også til å oppnå karakteristiske kolonier, for eksempel  Azospirillum sp, som gir skarlagens røde kolonier, blant andre.

Celle- og vevsfarging

En av de vanligste anvendelsene av Kongo rød er dens nytte ved diagnosen amyloidose. Denne merkelige sykdommen består i den ekstracellulære akkumulering av et unormalt protein i forskjellige organer. Dette anomale proteinet produseres i benmargen og kalles amyloid.

Kongo rød har en høy affinitet for dette stoffet. Denne egenskapen har blitt brukt for å demonstrere dens tilstedeværelse i histologiske vev. Kongo rød brukes ved siden av hematoksylin/eosin for dette formålet.

Foreningen av amyloidvevet og Kongo -rødt gis gjennom ikke -polare hydrogenbindinger, mellom karboksylgruppene og aminogruppen. Amyloidproteinet gir karboksylgruppene (COOH) og Kongo Red the Amino Group.

Amyloidvevet er farget i forskjellige nyanser som spenner fra rosa til intens rødt sett ved det optiske mikroskopet. I mikroskop med dobbelt polarisert lys blir disse preparatene observert med en eplegrønn patognomonic birefringnce.

Det vil si at de presenterer dikroisme, siden amieloide fibre er anisotropiske. Denne observasjonen bekrefter diagnosen.

Fargen på Kongo rødt vev er kompatibel med andre diagnostiske metoder, for eksempel immunocytokytiske metoder, å kunne til og med presolere.

Som pH -indikator

Egenskapen til å vri foran pH -endringer brukes av teknikken som kalles kromoendoskopi.

Denne teknikken bruker fargelegging og pH -indikatorer som lar visse patologier bli oppdaget. Blant dem er bruken av Kongo Red, som kan avsløre tidlige kreftlys i mageslimhinnen, og brukes som en surhetsmarkør.

Kan tjene deg: Pyrimidines: Kjennetegn, struktur, funksjoner

Teknikken er basert på det faktum at den røde pH -røde er svart er svart. Derfor, etter å ha plassert en løsning av Kongo rød på mageslimhinnen, vil områdene der det er fornuftig å ta prøven for biopsi, bli valgt, det vil si hvor det ikke er noen syreproduksjon. Dette antyder tilstedeværelsen av et kreftsyke fokus eller tap av parietalceller.

Referanser

1. “Kongo rød."" Wikipedia, gratis leksikon. 8. mai 12:13 UTC. 16. mai 04:08, er.Wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Ny metode for kvantifisering av endoglucanase-aktivitet basert på cellulose-rojo-kompleks Kongo. Orinoquia [Internett]. 2011 juni [sitert 2019 15. mai]; 15 (1): 7-15. Tilgjengelig fra: Scielo.org.
3. Peña j, uffo eller. Biofilmproduksjon i genotyper av Staphylococcus aureus Bovint mastitt isolert på Cuba. Rev Health Anim.  [Internett]. 2013 desember [sitert 2019 16. mai]; 35 (3): 189-196. Tilgjengelig på: Scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Kutane manifestasjoner av systemisk amyloidose som diagnostisk nøkkel: klinisk tilfelle. Rev. Méd. Chile [Internett]. 2012 apr [sitert 2019 16. mai]; 140 (4): 499-502. Tilgjengelig på: Scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sessini S, Mazziotta D. Spektrofotometre og fotokolloimeter praktisk oppdateringsveiledning. Latinamerikansk klinisk biokjemi [Online] 2005, 39 (Septue-Always): [Dato for konsultasjon: 15. mai 2019] Tilgjengelig på: Redalyc.org
6. Marín J, Díaz J og Solís J. Kromoendoskopi i infeksjon ved Helicobacter pylori: Er det en reaksjonstid? Rev Esp Savm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Organisk kjemi. Redaksjon tilbake. Barcelona, ​​Spania. Tilgjengelig på: Bøker.Google.co.gå
8. Murillo m. Histologiske fargingsteknikker. University of Guadalajara, Mexico. Tilgjengelig på: Akademi.Edu
9. Paillié m. Bestemmelse av cellulolitisk, ligninolitisk og ammilolitisk aktivitet av isolerte aktinobakterier av rhizosfærisk jord av hvit kløver (Trifolium Reng).2012. Pontificia Universidad Javeriana Fakultet for vitenskap Industriell mikrobiologi Bogotá D.C. Tilgjengelig på: depot.Javeriana.Edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Isolasjon og identifisering av stammer av Azospirillum sp. I Guinea pasto (Panicum Maksimal Jacq.) Del Valle del Cesar. Beiturer og fôr, 2010; 33 (3): 1-8 tilgjengelig på: Scielo.