Negativ farging

Bilde av negativ farging av influensavirus a. Kilde: Se side for forfatter, Wikimedia Commons

Hva er negativ farging?

De negativ farging Det er en spesiell fargemetode for å fremheve tilstedeværelsen av kapselen i noen mikroorganismer -hovedsakelig Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae og Cryptococcus neoformans-, fra kliniske prøver eller rene avlinger.

Den direkte brukte direkte prøven for å påføre negativ farging er cerebrospinalvæske. Denne teknikken representerer et raskt alternativ for den formodende diagnosen hjernehinnebetennelse, spesielt ved Cryptococcus neoformans.

Denne fargingen kan påføres sterilt sputum og væsker generelt, så vel som på stammer oppnådd fra unge rene avlinger. Teknikken bruker nigrosin eller kinesisk blekk for utførelsen, derfor er det en veldig enkel og økonomisk metodikk å anvende som gir informasjon om god diagnostisk verdi på kort tid.

I denne forstand er ethvert laboratorium i evnen til å utføre denne fargen. Selvfølgelig må laboratoriet ha et kompetent personell, som er i stand til å gjenkjenne gjærene til Cryptococcus neoformans isolert eller i gemasjon og skille dem fra leukocytter og gjenstander som prøven kan presentere.

Basis

Nigrosin og kinesisk blekk fungerer på samme måte, slik at begge stoffer kan brukes utient.

Denne teknikken kalles negativ farging fordi den virker i strid med resten av fargeleggsteknikkene. I dette er det som er uten farging strukturen som blir søkt eller som du vil se, det vil si mikroorganismer.

Derfor er fargen basert på å fargelegge bunnen av smøret i en mørk farge. I dette scenariet vil kapsulerte strukturer fremheve i lys eller fargeløse.

Vanligvis observeres gjærene, omgitt av en klar glorie som tilsvarer kapselen. Dette skjer fordi kinesisk blekk og nigrosin er stoffer som ikke kan trenge gjennom polysakkaridet som danner kapsel av levende mikroorganismer.

Kan tjene deg: butiserende gjæring

Det skal bemerkes at andre strukturer som kan være til stede i den direkte prøven, for eksempel leukocytter eller røde blodlegemer heller.

Nå, hvis mikroorganismer er døde, kan Tincture trenge inn i dem, slik at denne fargingen også er nyttig for å evaluere levedyktigheten til mikroorganismer.

Teknikk

Materialer

Nigrosin

Nigrosine skylder navnet til den svarte fargen som den har. Det er et syntetisk stoff som oppnås fra oppvarming av blandingen av organiske forbindelser -som nitrobenzein, anilin og anilinhydrokloritt -ved bruk av den reaksjonen en katalysator (jern eller kobber).

Kinesisk blekk

Kinesisk blekk er et stoff som hovedsakelig brukes av asiater til skriving, utdyping av kunstverk og monokromatisk maleri. Det er veldig populært i kinesisk kultur.

Det er hentet fra blekksprutblekken blandet med pulverisert kull, produkt av forbrenning av små harpiksholdige trær.

Det er også mulig å tilberede den fra sot av hydrokarbonforbrenning (vegetabilske oljer), sammen med en proteingelé som gir den passende konsistens for å unngå nedbør av kullpartikler.

Spesifikasjoner for prøvetaking

• Det krever ikke faste.
• Prøveprøven, sputum eller steril væske må inneholde minst 1 ml volum og må overføres til laboratoriet ved romtemperatur.
• CSF -prøver og sterile væsker bør tas av en spesialisert lege.
• Det kan også være en ren avling av en mistenkelig belastning knyttet til de nevnte patogenene.

Utførelse av teknikken med direkte prøver

• Prøvene må sentrifuges, deretter blir supernatanten kastet og sedimentet blir tatt.
• En dråpe sentrifugert materiale (sediment) og en dråpe kinesisk eller nigrosinblekk plasseres.
• Det må blandes godt og omslag med et omslag, og la dråpen strekke seg som en fin film uten å overskride kantene.
• Deretter er mikroskopforberedelsen montert.
• Hvis preparatet er veldig mørkt, kan den fortynnes med vann.

Kan tjene deg: kjemotropisme

Utførelse av teknikken med stammer fra dyrking

• En veldig liten del av en ung avling blir tatt med en såre nål og løses opp i en dråpe kinesisk blekk som tidligere er plassert på en ren lysbilde.
• Et deksel er plassert på toppen.
• Det observeres i 10x mikroskop og deretter på 40x.

Du kan også løse opp en del av kolonien i destillert vann, og derfra ta en dråpe og blande den med det kinesiske blekket. På denne måten vil preparatet ikke være så tykk, noe som muliggjør observasjon av strukturene isolert. Hvis det er agglomerasjoner, vil det ikke bli godt observert.

En annen metodikk er som følger:

• Plasser en fall i suspensjonen i den ene enden av lysbildet.
• Plasser en dråpe nigrosin i samme ende og bland.
• Ved hjelp av et annet lysbilde, forleng prøven som om den laget en hematologisk smøre.
• La tørke og observere i mikroskopet.

Mikroskopobservasjon

Først må det være fokusert med 10x mål for å ha en bred visjon av feltet. Deretter må du se etter hvis det er klare mellomrom. Hvis det er, fokus med 40x for å se detaljene.

Fordeler

• Det er enkelt å utføre.
• Det er en økonomisk teknikk.
• Denne metoden krever ikke at smøret blir festet til varme eller med kjemikalier, derfor blir mikroorganismer observert uten forvrengning.
• Fresco -forberedelser trenger ikke å være tørr, så det kan observeres umiddelbart, og genererer resultater raskt.

Ulempe

• Når den er montert, må ferske preparater observeres umiddelbart. Hvis de har lov til å tørke, er det ikke lenger mulig å observere dem og en ny.

Kan tjene deg: selvfertilisering

Tinning av vev med kinesisk blekk

En annen funksjon som kan oppfylle kinesisk blekk er i patologilaboratorier. Dette brukes i prøver av kirurgisk ekstrahert med det formål å markere tumorreseksjonsmarginene.

Det markerte vevet sprayes med eddiksyre. Dette fungerer som en mordant og forhindrer at blekket kommer ut når vevet er utsatt for rutinemessig prosessering for biopsiforberedelse.

Prosedyren består av å bade stoffet i alkohol og xylen, og deretter innebygd i parafinvoks. Denne merkingen guider patologen når du observerer vevet, og indikerer hvor marginen for kirurgisk reseksjon eller annet interessepunkt er.

Referanser

1. Nigrosin. Gjenopprettet fra Es.Wikipedia.org.
2. Forbes, f., SAHM, d., Weissfeld, a. Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. Pan -American redaksjon S.TIL.