Bhi agar hva er, grunnlag, forberedelse, bruker

Han Bhi Agar O hjernehjerteinfusjon. Det er et næringsrikt fast kulturmedium. På spansk omtaler vi ham som en infusjon cerebro hjerte agar. Det er et ikke -selektivt kulturmedium, som betyr at alle slags gram -positive og gramnegative bakterier kan utvikles, samt litt gjær og filamentøs sopp.

Det er sammensatt av hjerneinfusjon og kalvekjøtt, dyr -tissue peptic hydrolyz.

Det skal bemerkes at BHI Agar er et av de hyppigste kulturmediene i bakteriologilaboratorier. Det kan brukes uten kosttilskudd som en primær, subjektiv av kolonier oppnådd i andre selektive medier eller for å opprettholde stammer i laboratoriet.

På den annen side er det et ideelt middel å bli brukt som grunnlag i utarbeidelsen av berikede medier, for eksempel blodagar og sjokoladeagar. Begge idealer for å isolere krevende mikroorganismer fra ernæringssynet. Imidlertid bør det tas i betraktning at ettersom den inneholder glukose, er det ikke egnet for å observere hemolysemønstre.

På samme måte kan BHI -agaren brukes til fremstilling av spesielle midler for isolering av sykdomsfremkallende mikroorganismer av vanskelig vekst i vanlige medier, inkludert: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium difteriae og histoplasma capsulatum.

Med antibiotikatilsetningsstoffet blir BHI Agar et selektivt medium for soppisolering.

Basis

Det er et næringsrikt kulturmedium for å isolere moderat krevende mikroorganismer, og kunne øke berikelsen med tilsetning av blod og andre næringsrike tilskudd.

Det er et ikke -selektivt kulturmedium, derfor tillater vekst av mest positive og gramnegative bakterier, så vel som noen sopp. Imidlertid kan det bli selektivt med tilsetning av antibiotika.

Mediet inneholder infusjon av hjerne- og kalvekjøtthjerte, hydrolysert dyrevev og hydrolysert pankreas kaseinvev; Alle disse forbindelsene fungerer som kilder til vitaminer, aminosyrer, nitrogen og karbon.

Kan tjene deg: Flora og Fauna of Entre Ríos: Representative arter

Glukose er et karbohydrat som gir energi til mikroorganismer når de har gjæret det. Mens natriumklorid og desodiumfosfat opprettholder osmotisk balanse og gir en pH nær nøytralitet. Endelig gir agaren solid konsistens til miljøet.

Forberedelse

Vei 52 gram av det dehydrerte mediet og oppløs i en liter destillert vann. Ta blandingen til en varmekilde til den koker, og agiterer ofte under oppløsningsprosessen.

Du kan tilberede kiler eller BHI -agarplater uten tilsetningsstoffer.

Kiler

For kileforberedelse, server preparatet til de fyller halvparten av hvert rør, dekk til og steriliser i autoklav ved 121 ° C i 15 minutter, når du legger deg på en base til de stivner. Deretter hold i kjøleskapet til bruk.

BHI -kiler for Bacteroteca. Kilde: Foto tatt av MSc -forfatteren. Marielsa Gil.

Plater

Den oppløste blandingen er autoklava ved 121 ° C i 15 minutter, når den forlater har den lov til å avkjøle opp til 50 ° C og serveres 20 ml av mediet i petri sterile plater. De har lov til å stivne, bli investert og lagret i kjøleskap til de bruker. La platene ta omgivelsestemperatur før jeg så.

Medium pH må være 7,4 ± 0,2.

Det uforberedte mediet er beige og forberedt er lett rav.

Blodagar

Etter sterilisering av mediet, avkjøl opp til en omtrentlig temperatur på 45 til 50 ° C, tilsett på det tidspunktet blodet (50 ml), bland forsiktig for å homogenisere og server 20 ml på hver petriske plate. Hvis bobler dannes på tallerkenen, bør den lettere flammen på boblene for å fjerne dem føres raskt.

På samme måte kan spesielle medier utarbeides ved å tilsette de tilsvarende tilsetningsstoffene når blandingen når temperaturen 45 til 50 ° C.

Kan tjene deg: Fysiske evner

Mediet er kirsebærrødt.

applikasjoner

Bruk uten kosttilskudd

BHI -agaren uten tilsetningsstoffer er nyttig som en primær dyrking og for å så rene stammer av mikroorganismer lite eller moderat krevende for den påfølgende identifikasjonen.

Siden det er et lysfargemedium, er det ideelt for observasjon av pigmenter og også ved ikke å inneholde interferensielle stoffer, noen biokjemiske tester, for eksempel oksidase og katalase, eller montere andre biokjemiske tester fra kolonier fra denne agaren.

På samme måte er Bhi Agar bred.

Platene eller kilene plantet av overflaten med bakteriestammer blir inkubert ved 37 ° C i 24 til 48 timer. Mens, i sopp, vil temperaturen og inkubasjonstiden avhenge av typen sopp som søkes.

Som baseagar for utarbeidelse av andre medier

Med denne basen kan du forberede berikede og selektive medier.

Beriket

Hovedfunksjonen er å tjene som grunnlag for utarbeidelse av rutinen -bruk blod i mikrobiologilaboratorier. Spesielt er BHI -basen bidrar til isolering av stammer av Streptococcus sp. Imidlertid har det ulempen med å ikke være tilstrekkelig for observasjon av hemolysemønstre ved å inneholde glukose.

Det brukes også til fremstilling av kanin- eller hesteblod Haemophilus sp. For bedre resultater kan du legge til et anrikningstilskudd (ISAVALEX).

Hvis prøvene kommer fra luftveiene til agaren, kan bacitracine tilsettes for å hemme den medfølgende floraen og øke sannsynligheten for utvinning av stammene av stammene av Haemophilus sp.

På den annen side kan du tilberede blod (lam eller menneske) med cistina tellurito for å isolere Corynebacterium difteriae. På samme måte er det nyttig for å tilberede kaninblod, med aggregatet av cistine og glukose for isolasjon av Francisella tularensis.

Såing av blodagarplater gjøres ved utmattelse og inkubert ved 35-37 ° C i 24-48 timer i mikroaerofili (5-10% av CO₂).

Kan tjene deg: Filogenetisk tre: Typer og deres egenskaper, eksempler

Selektiv

Dette mediet med aggregat av antibiotika kan erstatte Sabouraud -agaren for soppisolering.

BHI -agaren kombinert med kloramfenikol - gentamycin eller penicillin -, streptomycin og hesteblod er ideell for isolering av Histoplasma capsulatum.

Avhengig av mikroorganismen som søkes å isolere inkubasjonen ved 35-37 ° C eller ved romtemperatur i aerobiose. Noen ganger er inkubering i begge temperaturområdene nødvendig, ved bruk av 2 plater for dette.

Noen sopp liker Trichophyton mentagrophytes De må inkuberes ved romtemperatur i opptil 7 dager.

QA

Fra hvert forberedt parti anbefales det å inkubere 1 plate eller kile ved 37 ° C i 24 timer og bekrefte at det ikke er noen vekst; Spesielt er det viktig når du tilbereder blod, fordi det er et lett forurensbart medium.

På den annen side kan kvaliteten på mediet evalueres inokulerende kjente eller sertifiserte mønstre stammer og observere dets utvikling.

For å evaluere BHI Agar uten tilsetningsstoffer kan du bruke stammer av Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C blir inkubert i aerobiose i 24 til 48 timer. I alle tilfeller forventes tilfredsstillende vekst.

For å evaluere blodagarplater kan du så belastninger av  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 eller Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

Bakteriestammer inkuberes ved 37 ° C i mikroaerofili i 24 timer, mens soppen inkuberer ved romtemperatur i fuktig kammer opp til 7 dager. I alle tilfeller forventes det tilfredsstillende vekst.

Referanser

1. Britania Laboratories. Brain Heart Infusion Agar. Tilgjengelig på: Britanialab.com.
2. BD Laboratories. Brain Heart Infusion (BHI) Agar. Tilgjengelig på: BD.com.