Biggy agar, forberedelse og bruk

Han Biggy Agar Det er et solid, selektivt og differensialkulturmedier. Den ble designet for å isolere og hjelpe til med å identifisere hovedarten til Candida. Hans navn Biggy kommer fra forkortelsen i engelsk vismut glukoseglycine yeas.

Den opprinnelige formelen ble opprettet av Nickerson, så dette mediet er også kjent som Nickerson Agar. Det er for tiden sammensatt av gjærekstrakt, glycin, dekstrose, ammoniumcitrat, vismutcitrat, natriumsulfitt og agar.

Grafisk representasjon av Biggy Agar. Kilde: Flickr.com

Biggy agar er formulert for differensiering av komplekse arter C. Albicans, ca. Tropicalis, ca. Krusei og c. Kefyr, Men andre arter som Candida glabrata, c. parapsilosis, ca. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum candidum og Saccharomyces cerevisiae.

Den har god følsomhet og spesifisitet, når du sammenligner den med andre medier med lignende funksjon, er dette på andreplass, og blir overvunnet av Chromagar. Av denne grunn foretrekker mange laboratorier sistnevnte, selv om det er mye dyrere.

Det skal være klart at bruken av Biggy Agar, så vel som andre lignende midler, hjelper en rask presumptiv identifikasjon, men aldri bekreftende. Derfor må ytterligere identifikasjonsmetoder være tilgjengelige; For eksempel Vitek 32 og API 20 identifikasjonssystemer.

[TOC]

Basis

Biggy -agaren regnes som et delvis selektivt medium for isolering av gjær, spesielt av Candida -slekten, selv om andre sjangre kan vokse.

Det er også et differensialmedium fordi avhengig av de involverte artene, vil forskjellige egenskaper bli observert i aspekt, farge, form og størrelse. Det regnes som et kromogent medium, for utvikling av forskjellige farger i koloniene.

Kan tjene deg: metionin: egenskaper, funksjoner, mat, fordeler

Fargen presentert av koloniene til gjær skyldes tilstedeværelsen av vismut sulfitt i agaren. Nickerson innså at gjærene til slekten er kandidat. Dette stammer fra kolonier mellom lys til svart.

Denne agaren inneholder gjær- og dekstroseekstrakt, som gir kilden til grunnleggende næringsstoffer og energi for utvikling av gjær. Glycin er en stimulerende vekst av gjær, mens vi hemmer utviklingen av visse bakterier.

I samme forstand fungerer ammonium og vismutcitrat, samt natriumsulfitt som bakteriell veksthemmere. Agaren er agenten som gir den solide konsistensen til miljøet.

Forberedelse

Vei 45 gr dehydrert kultur og oppløs i en liter destillert vann. Rist og varm blandingen, la koke i 1 minutt til den komplette løsningen. Dette kulturmediet er ikke sterilisert i autoklave.

Når avkjøling er omtrent 45 ° C i Maria, hell 20 ml på petriskallplater.

Fargen på det dehydrerte mediet er gulaktig og tilberedt grå er en gulaktig hvit gel, der et lite flokkulant bunnfall kan observeres.

PH må være 6,8 ± 0,2.

Det tilberedte mediet må lagres i kjøleskap (4 ° C) og beskytte mot lys. Som et middel som ikke er selv -klava, bør brukes så snart som mulig. Bruken anbefales før den møtes 3 dager siden utarbeidelsen.

Kan tjene deg: biomaterialer

Bruk

Platene inkuberes ved romtemperatur (25 ° C) med 24, 48 og 72 timer, inkubasjonstiden kan forlenges opp til 5 dager.

Hver art av Candida utvikler visse egenskaper som får dem til å skille fra hverandre. De mediumprodusentene beskriver følgende egenskaper for hver art:

-Candida albicans kompleks: Den utvikler seg i denne agaren som glatte, runde, brune eller svarte kolonier, med en liten mycelial kant. Med den forbehold om at den mørke fargen ikke er spredt til miljøet.

-Candida Tropicalis: De lyse, små, mørke lyse koloniene, med svart og lys mycelial kant. Den mørke fargen sprer seg mot miljøet, karakteristisk som er typisk for denne arten, etter å ha blitt inkubert i 72 timer.

-Candida Krusei Utvikle grove, flate seirende kolonier, med kanten mellom brun til Negruzco.

-Candida parakrusei: mellomstore kolonier, mesteparten av tiden med grovt utseende, flat. Fargen kan variere mellom lys mørk rødlig kaffe til lys rødlig kaffe. Kanten av koloniene har et omfattende, gulaktig mycel.

-Candida stellelatoid: Utvikle middels, flate kolonier, mørkebrun, nesten svart. Mycelial utvikling er veldig knapp.

En studie av Yücesoy og Marol i 2003, viste at kromagarmediet gir bedre følsomhet og spesifisitet for differensiering og identifisering av forskjellige Candida -arter enn Biggy Agar.

QA

For sterilitetskontroll blir platene inkubert uten inokulering ved 25 ° C, i mørket i 24 til 48 timer, er det forventet at det ikke er noen vekst av noe slag eller fargeendring.

Det kan tjene deg: Berøringsfølelse: Deler, hvordan det fungerer og funksjoner

De anbefalte ATCC -stammene for å utføre kontroll av middels kvalitet er:

Candida albicans Complex  ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. I alle av dem forventes veksten som beskrevet ovenfor.

Du kan også bruke følgende stammer:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 og Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. I de to første forventes den totale hemming, men i tilfelle delvis dyrking vil koloniene være kremfarge.

I tilfelle av S. aureus Det forventes å bli helt hemmet, men hvis de vokser delvis, er koloniene hvite.

Begrensninger

Noen bakterier er i stand til å utvikle seg i dette mediet og kan til og med bli mørke, og simulere en Candida -nabo.

Tabell: Kjennetegn på koloniene til noen gjær i Biggy ble enige i henhold til arbeidet med Yücesoy M og Marol s.

Kilde: Yücesoy M, Marol S. Ytelse av kromagar candida og biggy agar for identifisering av yeas arter. Ann Clin Antimicrob mikrobiol. 2003; 2 (8): 1-7

Referanser

1. Yücesoy M, Marol S. Ytelse av kromagar candida og biggy agar for identifisering av yeas arter. Ann Clin Antimicrob mikrobiol. 2003; 2 (8): 1-7.
2. MCD Lab. Biggy aldrende teknisk fil. Tilgjengelig på: McDlab.nett/
3. Lab neogen. Biggy Agar. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen.com
4. Conda Pronadisa Laboratories. Biggy Agar. Tilgjengelig på: Condalab.com
5. BD Laboratories. BD Biggy Agar (Bismuth Glucose Glycine Yaest Agar). 2011. Tilgjengelig på: BD.com