Bilis Agarc

Han Bilis Agulina Det er et selektivt og differensial fast kulturmedium. Det brukes som en diagnostisk test for å bestemme evnen til en viss mikroorganisme av å vokse i et medium som inneholder galle og også dekomponere glykosidskulinet i skulptin og glukose.

Denne diagnostiske testen brukes til å skille arter fra slekten Streptococcus som tilhører gruppe D (positiv skulptur), fra andre Streptococcus -grupper som reagerer negativt foran denne testen.

Bilis Bilis -plate, sembrert med en enterococcus -stamme (positiv test). Kilde: Ingen maskinlesbar forfatter gitt. Philippinjl antok (basert på copyright -krav). [Offentlig domene]

Det skal bemerkes at noen Streptococcus fra Viridans -gruppen kan hydrolyz.

På den annen side er den middels galle også nyttig for diagnosen av Listeria monocytogenes eller arter av Aerococcus sp, Siden disse mikroorganismene er positive skulpturende galle.

Den skulpturelle galleagaren er sammensatt av pepton, kjøttekstrakt, okse galle, skulptur, jerncitrat, agar og destillert vann. Noen kommersielle hus inkluderer natriumazida innenfor sammensetningen av mediet.

Mediet kan fremstilles på laboratoriet hvis du har alle forbindelsene hver for seg eller kan fremstilles fra det kommersielle dehydrerte miljøet.

[TOC]

Basis

Sculpton -mediet inneholder peptoner og kjøttekstrakt, begge forbindelser gir de nødvendige ernæringsmessige stoffer for vekst av mikroorganismer.

Den inneholder også sculline; Denne forbindelsen er en glukóside dannet av foreningen av et enkelt monosakkarid (glukose) med en forbindelse kalt 6,7-dihydroxymarin eller scupply (Agluconon), sammen med en acetal eller glukosidbinding.

Testen er basert på å demonstrere om bakteriene er i stand til å hydrolyz. Hvis dette skjer, er skulpturen brutt ned i scups og glukose. Sculetin reagerer med jern til stede i midten, og danner en mørkebrun, nesten svart forbindelse.

Kan tjene deg: Termoregulering: Fysiologi, mekanismer, typer og endringer

Dette betyr at jernscitrat fungerer som en reaksjonsutvikler. Denne funksjonen gjør skulpturende galleagar til et differensialmedium.

På den annen side er galle en hemmer som forhindrer veksten av noen mikroorganismer, derfor må bakterier før utfoldelse av sculline kunne vokse i nærvær av galle. Derfor anses dette mediet som selektivt.

Bakteriene som kan utvikle seg i dette miljøet er hovedsakelig de som lever i tarmmiljøet.

I denne forstand tilfører noen kommersielle hus til natriumazidmediet for i tillegg hemmer veksten av gramnegative bacillier, noe som øker selektiviteten til mediet for vekst av Streptococcus.

Endelig gir agaren den faste konsistensen til miljøet, og vannet er løsningsmidlet til forbindelsene.

Forberedelse

Hjemmelaget galleskulpturforberedelse

Veie:

5 g PEPTONES

3 g kjøttekstrakt

40 g okse galle

1 g skulptur

0,5 gr jerncitrat

15 g agar

1000 ml destillert vann

I tilfelle tilsetning av natriumazid.

Oppløs komponentene i liter destillert vann, varm til forbindelsene oppløses i sin helhet. Fordel 5 ml i testrør med 16 x 125 mm trådlokk. Autoclavar ved 121 ° C, 15 pund i 15 minutter.

Fjern fra autoklaven og vipp rørene på en støtte, slik at agaren stivner i en bred fløytestopp.

Hold deg i kjøleskap til bruk. Ta med romtemperatur før jeg så.

Kan tjene deg: geografisk isolasjon

Du kan også tilberede galle -skulpturplater; I dette tilfellet er hele blandingen autoklava i en Felola og deretter distribuert i petriske sterile plater. De lar seg stivne og holde seg i kjøleskapet.

Medium pH må være 6.6 ± 0,2.

Utarbeidelse av Bilis Agulina fra kommersielle medier

Veie beløpet som er spesifisert av innsatsen. Dette kan variere fra ett kommersielt hus til et annet. Deretter fortsetter du lik prosedyren som er forklart ovenfor.

Medium pH må være 6,6 ± 0,2. Fargen på det dehydrerte mediet er lys beige og det forberedte mediet er mørkt rav.

Halv galle kommersiell skulptur. Kilde: Foto tatt av MSc -forfatteren. Marielsa Gil.

applikasjoner

Det skulptiske mediet brukes hovedsakelig til å differensiere Streptococcus av gruppe D (positiv skulpturgalle), fra resten av Streptococcus -gruppene (negativ skulpturgalle).

Hvis veksttesten er kombinert i hypersalisert buljong med testen av skulpturen, kan identifiseringen av en spesiell Streptococcus -gruppe av gruppe D kalt enterococcus identifiseres.

Denne spesielle Streptococcus -gruppen tilhører gruppe D av den nevnte sjangeren og er i stand til å hydrolyz 6,5%natrium), eiendom som gjør forskjellen.

Derfor Streptococcus som hydrolyz.

Sådd

Inokulere mediet helst fra en 24-timers ren buljong av Todd-Hewitt.

Tilsett 2 dråper på middels overflate med en pasteurpipette og strekker deg i midten med et platinahåndtak.

Kan tjene deg: Pelagic: Egenskaper, flora, fauna

Inkuber ved 35 ° C i 48 timer, mens inkubasjonstiden er oppfylt, kan den overvåkes for å se om det er en positiv reaksjon. Hvis reaksjonen på slutten av tiden forblir negativ, kan inkuberes til den er fullført 72 timer.

Tolkning

Positiv reaksjon: Utseende av en mørkebrun farge, nesten svart i fløytetoppen (i tilfelle rørprøven) eller svertening av agaren rundt koloniene (i tilfelle platetesten).

Negativ reaksjon: Det er ingen sverking av mediet, eller det er utseendet som svart farge i mindre enn halvparten av røret etter 72 timers inkubasjon. På den annen side bør bakterievekst i midten uten utseende av svart farge betraktes som en negativ test.

QA

For å evaluere kvaliteten på mediet, en belastning av Enterococcus faecalis ATCC 29212 som en positiv kontroll og en streptokokkerstamme som ikke tilhører gruppe D som en negativ kontroll.

Begrensninger

-Media som ikke inneholder natriumazid tillater vekst av gram negativ baciller. Noen av dem kan blacke mediet.

- Noen kommersielle hus tilfører lav gallekonsentrasjon (10%), og av denne grunn kan noen streptococcus som ikke tilhører gruppe D utvikle seg i miljøet og hydrolysere skulinet, noe som kan generere feil i tolkningen.

Referanser

1. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 Ed. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.
3. Mac Faddin J. (2003). Biokjemiske tester for identifisering av bakterier for klinisk betydning. 3. utg. Pan -American redaksjon. Buenos Aires. Argentina.
4. Lab. Britannia. Skulptur av galle med azida agar. 2015. Tilgjengelig på: Britanialab.com
5. "Bilis Sculpture Agar."" Wikipedia, gratis leksikon. 22. august 17:30 UTC. 22. april 2019, 17:35. er.Wikipedia.org.
6. BD Laboratories. Galle Eculin Agar skråner. 2015. Tilgjengelig på: BD.com
7. Neogen Laboratories. Bilis Agulina. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen.com