Holder det som er, fundament, forberedelse, bruker

Han Endo Agar eller middels endo er en solid, differensialkultur og med en viss grad av selektivitet. Den opprinnelige formelen ble opprettet av Endo i 1904 for å differensiere de gjærære bakteriene til den ikke -fermenterende laktosen. Første Salmonella typhi, Men senere vendte målet med mediet seg til søket etter coliforms.

Begynnelsen på Endo Agar har holdt seg, men formuleringen har fått utallige endringer gjennom årene. For øyeblikket er mediet sammensatt av dyrevevspeptisk, laktose, hydrogen puffling, natriumsulfitt, basisk fuchsin og agar og agar.

Hovedbruken av mediet har vært knyttet til isolasjon og differensiering av gram -negative baciller som tilhører Enterobacteriaceae -familien og andre familier i nærheten.

I lang tid ble det brukt i påvisning av koliformer i vannprøver, meieri og mat, men i dag har bruken av dette mediet blitt fortrengt av andre med lignende funksjoner. Noen mikrobiologilaboratorier bruker imidlertid denne agaren til isolasjon fra kliniske prøver.

Basis

Endo Agar inneholder peptoner som fungerer som en kilde til aminosyrer, nitrogen, karbon og energi, nødvendig for vekst av lite krevende mikroorganismer.

På den annen side er den litt selektive karakteren til agaren gitt ved aggregatet av natriumsulfitt og grunnleggende fuchsin; Begge komponentene delvis eller hemmer utviklingen av mest positive grambakterier.

Differensialkarakteren er gitt ved tilstedeværelsen av gjærbart karbohydrat, som i dette tilfellet er laktose og grunnleggende fuchsin, som også fungerer som en pH -indikator.

Kan tjene deg: taktisme

Gram -negative bakterier som vokser i denne agaren og er i stand til å gjære laktose vil danne sterke rosa kolonier; å være patognomonic av Escherichia coli Dannelsen av mørkerøde kolonier med en grønnaktig metallisk glans. Dette skyldes høy syreproduksjon fra karbohydratfermentering.

Det skal bemerkes at mediet som finnes rundt koloniene også gjør en sterk rosa farge. Mens gram negativ bacilli ikke -fermenterende laktose fra blekrosa kolonier som ligner på mediet eller fargeløse.

Hydrogen -dopotassiumfosfat balanserer pH i mediet, og agaren er komponenten som gir den faste konsistensen.

Forberedelse

Endo Agar

Vei 41,5 gr av det dehydrerte mediet og oppløs i 1 liter destillert vann. Varm blandingen omrøring ofte til det er total medium oppløsning. Steriliser i autoklav ved 121 ° C, 15 pund trykk, i 15 minutter.

Når du fjerner autoklaven, la deg avkjøle til en omtrentlig temperatur på 45-50 ° C, rist blandingen for å homogenisere før servering. Hell 20 ml i petriske sterile plater.

La stivne platene, investere og spare i plakk eller pakk med mørkt papir før du sparer i kjøleskap. Det er veldig viktig å beskytte det forberedte miljøet mot direkte lys. En anbefalt praksis er å utarbeide det nøyaktige beløpet som skal trengs.

Hvis de er lagret i et kjøleskap, bør tallerkenene få temperament før de bruker.

Medium PH må være mellom 7,2 og 7,6 og fargen på det tilberedte mediet er blekrosa farge.

M-Endo-agent

Det er en annen versjon av Endo Agar (M-Endo) som følger McCarthy, Delaney og Grasso Formula, som inneholder flere forbindelser og varierer i form av forberedelse.

Det kan tjene deg: Zygote: Klassifisering, trening, utvikling og segmentering

Denne varianten inneholder: laktose, triptose, fordøyd kasein enzymatisk, dyrevev enzym, natriumklorid, dibásisk kaliumfosfat, natriumsulfitt, gjærekstrakt, monobasisk fosfat, grunnleggende fuchsin, nodium layout, laurril sodrium layout, laurir sodril sodium layout, laurior sodium layout, laurir sodium layout, laurir -sodium layout, laury -sodium layout, laur.

I dette tilfellet veier 51 gr av det dehydrerte mediet og suspendert i 1 liter destillert vann som inneholder 20 ml etanol.

Varm litt mens du rører for å løse opp mediet helt. Det skal ikke overopphetes og verken sterilisere i autoklav. Når blandingen er homogen, server du i petriske sterile plater og la stivne.

Bruk

I noen land brukes det fremdeles til å telle totale og fekale koliformer i vann- og matprøver, spesielt tilstedeværelsen av Escherichia coli som hovedindikator på fekal forurensning.

M-Endo Agar anbefales av American Public Health Association (APHA) for overvåking og kontroll av desinfeksjons- og behandlingsprogrammer for avløpsvann, samt i evalueringen av kvaliteten på drikkevann.

Den mest brukte metoden er membranfiltrering, forhåndsberikelse av prøven med laurylsulfatbuljong i 2 til 4 timer.

Det kan også brukes som en erstatning for EMB -agaren i den mikrobiologiske analysen av mat og vann med den mest sannsynlige tallteknikken (NMP), spesielt i den komplette bekreftende fasen for å bekrefte tilstedeværelsen av OG. coli fra grumsete EC -buljonger.

QA

For å evaluere kvaliteten på forberedelsesavslutningen, blir kjente eller sertifiserte kontroller sådd.

Blant belastningene som kan brukes til dette formålet er: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 11775, Enterobacter kloakk ATCC 13047, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Flexneri ATCC 12022, Proteus mirabilis ATCC 14153 og Enterococcus faecalis ATCC 11700.

Det kan tjene deg: Flora og fauna i den andiske regionen: Representative arter

Stammene blir sådd ved utmattelse og inkubert ved 37 ° C i 24 timer i aerobiose.

De forventede resultatene er:

• Til Escherichia coli: Sterke røde kolonier, med metallisk glans.
• Til OG. Cloacae og K. pneumoniae Koloniene må være rosa mucoids.
• I tilfelle av S. Typhimurium, s. Flexneri og p. Mirabilis Koloniene er vanligvis blekrosa eller fargeløse.
• Endelig, OG. Faecalis Det forventes å bli delvis hemmet, derfor må veksten være dårlig med veldig små rosa kolonier.

Begrensninger

-Endo -mediet har under selektiv kraft, derfor kan det vokse noen gram -positive mikroorganismer som Staphylococcus, Enterococcus og til og med gjær.

-Andre baciller som ikke tilhører enterobacteriaceae -familien kan utvikle seg i dette mediet, for eksempel som Pseudomonas sp og Aeromonas sp. Egenskapene til disse stammene er fargeløse uregelmessige kolonier.

-Dette tilberedte mediet er veldig følsomt for lys, derfor en langvarig eksponering for denne forverringen av indikatorsystemet, og skader miljøet irreversibelt.

-De mediumkomponentene anses som kreftfremkallende, så direkte kontakt må unngås.

-Det dehydrerte mediet er veldig hygroskopisk og må opprettholdes i sin opprinnelige beholder ved romtemperatur, godt lukket og i et tørt miljø.

Referanser

1. BD Laboratories. Endo Agar. Tilgjengelig på: BD.com
2. Neogen Laboratories. Jeg er agar. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen.com