Salmonella-Shigella Agar

Han Salmonella-Shigella Agar Også kjent som SS Agar, det er et moderat selektivt og differensialmedium, spesielt designet for isolering av enteropatogene bakterier av Salmonella og Shigella -sjangre, både av miljø- og kliniske prøver.

SS -agaren har en kompleks komposisjon; Den består av kjøttekstrakt, pepton, laktose, gallesalter, natriumcitrat, natriumtiosulfat, jernsitrat, agar, nøytral rød, lysegrønn og destillert vann. Gitt sin store selektivitet, kan prøver sås med rikelig blandet flora.

SS Agar med Salmonella SP -kolonier. Kilde: Manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https: // creativecommons.Org/lisenser/by-SA/4.0)], fra Wikimedia Commons

I mikrobiologilaboratorier er Salmonella-Shigella-mediet mye brukt for å undersøke tilstedeværelsen av Salmonella og Shigella i prøver av diaré avføring, avløpsvann, drikkevann og mat.

Noen ganger er det nødvendig å bruke pre-Enrique buljonger (laktosadobuljong) og berikelse (Selenito cistina buljong) for å gjenvinne salmonellestammer.

Disse trinnene er påkrevd når eksistensen av Salmonella mistenkes i veldig lav mengde, eller hvor belastningen kan bli mishandlet ved industrielle produksjonsprosesser, hovedsakelig bearbeidet mat. Det anbefales også å berike avføringsprøver fra pasienter som har blitt behandlet med antibiotika.

Deretter kan den berikede buljongen sås i Salmonella-Shigella Agar og i andre lignende medier, for eksempel Xilosa Agar, Lysina Desoxicolate (XLD) og Agar Hektoen Enteric (HE).

Basis

Hver komponent i Salmonella-Shigella-kulturen har en spesifikk funksjon, og blandingen som helhet gir egenskapene som kjennetegner den.

Ernæringskraft

Kjøttekstrakt og pepton (fordøyd med animalsk vev) gir de nødvendige næringsstoffene (nitrogener, karbon og vitaminer) for utvikling av mikroorganismer som er i stand til å tolerere resten av komponentene.

Kan tjene deg: Ribulosa: Karakteristikker, struktur og funksjoner

Konsistens

Agar -Agar er ansvarlig for å gi solid konsistens til miljøet.

Selektiv

Dette mediet er svært selektivt fordi det inneholder gallesalter, natriumcitrat og lysegrønt. Derfor hemmer det veksten av alle gram positive bakterier og mest gramnegative baciller, inkludert noen koliformer.

Mens bakteriene til slekten Salmonella og noen stammer av Shigella hvis de støtter disse forbindelsene.

Hovedsakelig er Salmonella -slekten veldig motstandsdyktig mot gallesalter, så mye at de er i stand til å leve i galle galleblæren til noen bærerpasienter som stadig utviser bakterier ved avføring.

Differensial

Laktose er gjærbart karbohydrat som hjelper til. Denne egenskapen bevises av tilstedeværelsen av pH -indikatoren, som i dette mediet er det røde av fenol.

Laktosegjærende stammer gir røde kolonier, mens ikke -fermentering er fargeløse. Denne funksjonen er viktig, siden Salmonella og Shigella ikke gjærer laktose.

På den annen side inneholder dette mediet natriumtiosulfat som en kilde til sulfid og jernscitrat som en jernkilde. Begge forbindelsene klarer å skille bakterier som er i stand til å produsere hydrogensulfid. Disse reagerer for å danne et svart bunnfall av uoppløselig og synlig jernsulfid.

Denne egenskapen har noen stammer av Salmonella -slekten. Normalt er koloniene fargeløse flate med et svart punkt i midten av det samme. Resten av salmonellas produserer ikke h₂S og utvikler seg som fargeløse kolonier.

På den annen side er koloniene til Shigella -slekten fargeløs flate uten å sverte.

Kan tjene deg: Parthenogenesis

Forberedelse

Dette mediet er veldig enkelt å tilberede.

Vei 63 gr dehydrert kommersielt medium og oppløs i en liter destillert vann. Varm løsningen og rist.  Blandingen kan nå kokingen i minutter i minutter.

Dette mediet skal ikke autoklaveres. Etter oppløsningen brukes den direkte på enkle eller doble sterile plater.

Ved å stivne bestilles de på en omvendt måte i blodplater og lagres i kjøleskap (2-8 ° C) til bruk.

Mediet etter utarbeidet må være ved pH 7,2 ± 0.2 og med appelsinrød.

Det er viktig å la platene temperere før de så på prøvene. Den originale prøven kan såres direkte, nedlasting av materiale i en del av agaren og deretter derfra for å bli slitt av utmattelse.

Ved å bruke berikede buljonger, passerer en del av Selenito -buljongen og så med Drigalski Spatula.

37 ° C blir inkubert i 24 timer i aerobiose.

Husk at mengden gram til tross for og den endelige pH i mediet kan variere fra et kommersielt hus til et annet. Middels onde bringer alltid indikasjonene for det.

Bruk

Det brukes ofte i analysen av coproultures og i den mikrobiologiske studien av avløpsvannprøver, forbruksvann og mat.

Ofte tilberedes doble plater, på den ene siden er Salmonella-Shigella-agaren plassert og i den andre XLD-agaren.

Begrensninger

-Noen Shigella -stammer vokser ikke i dette mediet. Derfor anbefales det ikke for primær isolering av denne sjangeren.

-Ikke alle gjennomsiktige koloni med svart senter er en indikasjon på Salmonella; Biokjemiske tester må utføres for å gjøre en riktig identifikasjon, siden koloniene til noen proteinstammer ikke kan skilles fra Salmonella.

Kan tjene deg: Befolkning av dyr eller biologisk

-Det dehydrerte mediet må ta seg av eksponering for miljøet, siden det er veldig hygroskopisk. Derfor må det holdes i et tørt og godt lukket miljø. Åpent i veldig korte perioder.

-Over tid kan gallesaltene i mediet presipitere, og danne et bilde som ligner på et viklet inni agaren, men dette påvirker ikke resultatene.

-Noen Shigella -stammer kan sakte gjære laktose.

QA

For å bevise at mediet fungerer som det skal, er det tilrådelig.

For dette kan du bruke stammer av OG. Coli, Enterobacter SP, Klebsiella pneumoniae, Shigella Flexneri, Salmonella Typhimurium enten Enterococcus faecalis.

De forventede resultatene er:

Escherichia coli --Rosa konvekse kolonier.

Enterobacter og Klebsiella- Store kolonier og røde eller rosa mucoides.

Shigella Flexneri --flate eller fargeløse flate kolonier.

Salmonella typhimurium - Fargeløse kolonier med svart sentrum.

Enterococcus faecalis-- Total hemming.

Referanser

1. Diffco Laboratories Francisco Soria Melgizo. Salmonella-Shigella Agar. Tilgjengelig på: F-Soria.er
2. BD Laboratory. BD Salmonella-Shigella Agar. Tilgjengelig på: BD.com