SIM Foundation, forberedelse og bruk

Han Sim medium Det er en semi -solid og differensialagar, spesialdesignet for å hjelpe til med å identifisere noen bakterier, hovedsakelig fra enterobacteriaceae -familien. Det er sammensatt av triptein, pepton, jernsulfat, ammoniumsulfat, natriumtiosulfat og agar.

Dette mediet tillater utførelse av tre viktige tester: produksjon av hydrogensulfid (h₂S), dannelsen av indol og bevegelighet, derfra kommer forkortelsen SIM. På grunn av det store verktøyet, kan det ikke mangle i et bakteriologilaboratorium.

TIL. Middle Sim Commercial B. SIM H2S (-), Indol (-) og Motilitet (+) og SIM H2S (+), Indol (-), Motilitet (+) testtest. Kilde: a. Foto tatt av forfatteren MSc. Marielsa Gil f. Mfloayza [CC BY-SA 3.0 (https: // creativecommons.Org/lisenser/by-SA/3.0)]

I motsetning til andre medier, må dette være semi -solid for å oppdage bevegelsesevnen som noen bakterier har. I denne forstand fungerer denne testen veldig bra for enterobakterier, men ikke i ikke -fermentary negative baciller, der andre metoder foretrekker å bruke, for eksempel den verserende dråpen.

SIM -mediet gjør det mulig å skille visse spesifikke egenskaper som kjennetegner noen bakterier i forhold til andre. For eksempel Escherichia coli kjennetegnes ved å være h₂S (-), Indol (+) og bevegelighet (+), mens Proteus mirabilis det er h₂S (+), Indol (-), Motilitet (+).

[TOC]

Basis

Det er en kultur betyr at det anses som differensial, fordi bruken klarer å skille mellom mikroorganismene som er i stand til å produsere hydrogensulfid fra de som ikke gjør det; Det fremhever også de som danner indol fra tryptofan fra de som ikke danner, og til slutt skiller de bevegelige bakteriene fra immobile.

Strømkilde

Som alle kulturelle midler har den elementer som gir de nødvendige næringsstoffene slik at ikke -følgende mikroorganismer kan utvikle seg. Disse elementene er representert av Peptones og Triptein.

Utviklingen av mikroorganismen i miljøet er viktig for å observere tilstedeværelsen eller fraværet av egenskapene som dette betyr evaluerer.

Hydrogensulfidproduksjon

Brevet S i forkortelsen sim refererer til produksjon av hydrogensulfid (h₂S). Bakterier som er i stand til å danne hydrogensulfid vil ta natriumsulfat.

Kan tjene deg: Intra -spesifikk konkurranse: Kjennetegn, typer og eksempler

Når H er dannet₂S -Gas fargeløs-, dette reagerer med jernsalt til stede i midten, og danner jernholdig sulfid, tydelig synlig (svart bunnfall). Bakteriene som ikke danner h₂S, la det originale fargemediet (beige).

Tilstedeværelsen av svart bunnfall kan hindre tolkningen av bevegelighet. Det er imidlertid kjent at de fleste HT -produserende enterobakterier₂S er positiv bevegelighet, som Salmonella, Proteus og Citrobacter. I tillegg antyder det svarte bunnfallet som dekker nesten hele mediet, positiv bevegelighet.

Indolformasjon

Den andre bokstaven i forkortelsen er "jeg", som representerer dannelsen av indol.

I denne forstand oppfyller Tripteine, i tillegg til å være en kilde til næringsstoff, en annen grunnleggende funksjon. Denne peptonen er rik på en aminosyre som kalles tryptofan, derfor kan den vise bakterier som produserer triptofanase.

Dette enzymet er ansvarlig for clivar til triptofanaminosyren, med den påfølgende dannelsen av indol (fargeløst stoff), pyruvinsyre og ammonium.

Det er grunnen til at for å vise denne reaksjonen er det nødvendig. En av de to reagerer med Indol, og danner en rød-fucsia-formet ring på overflaten av agaren. Hvis Fuchsia -fargingen vises, tolkes Indol -testen som positiv.

Bakteriene som ikke har dette enzymet, vil ikke danne ringen og tolkes som en negativ indol -test.

Det er viktig å merke seg at Indol -beviset må være det siste som blir tolket, siden når reagenset er tilsatt, hindrer mediet visualiseringen av bevegelighet.

Bevegelighet

Endelig betyr bokstaven "m" av ordet sim. For å evaluere bevegelighet er dette mediet strategisk semi-solid, siden denne egenskapen er viktig for å observere om det er bakteriebevegelse eller ikke. Bakteriene som har flagella er de som gir denne positive testen.

Kan tjene deg: T -lymfocytter: struktur, funksjoner, typer, modning

En positiv test vil bli bevist når turbiditet blir observert, både i den innledende inokulum og rundt dette. Mens ikke -mobile bakterier bare utvikler seg på den innledende inokulumreisen.

Forberedelse

Sim medium

Vei 30 gr dehydrert medium og oppløs i en liter destillert vann. Blandingen blir liggende i ro i 5 minutter og blir deretter oppvarmet til de koker, ofte rører til den er fullstendig oppløsning.

Fordel blandingen i testrør med bomullslokk og autoklavat ved 121 ° C i 15 minutter. Fjern racket med autoklavrør og la størkne i en vertikal stilling, slik at mediet er i form av en taco.

For bevaring er det spart i kjøleskap til dens bruk. Det forberedte mediet må ha en endelig pH på 7,3 ± 0,2.

Når du inokulerer mediet, må dette være ved romtemperatur. Fargen på mediet er beige.

Kovacs reagens

Mål 150 ml amyl eller isoamyl eller butylalkohol. (Bruk en av de tre nevnte).

Oppløs 10 gr p-dimethylaminobenzaldehyd. Tilsett deretter 50 ml konsentrert saltsyre.

Reagenset klart til bruk er fargeløs eller klar gul. Den må oppbevares i ravflaske og lagres i kjøleskap. Ikke bruk hvis du tar en mørkebrun farge; Som indikerer at det er skadet. Dette reagenset er å foretrekke når det gjelder enterobakterier.

Erlich Reagent

Vei 2 gr p-dimethylaminobenzaldehyd og oppløs i 190 ml absolutt etylalkohol og bland sakte med 40 ml konsentrert saltsyre. Hold Kovacs reagens på samme måte. Ehrlichs reagens brukes mer til ikke -fermentering og anaerobe bakterier.

applikasjoner

SIM -mediet er sterkt brukt i bakteriologilaboratorier. Det har som en fordel at tre viktige egenskaper kan observeres ved identifisering av enterobakterier.

Kan tjene deg: eddik gjæring: egenskaper, applikasjoner, eksempler

Sådd

Den rette måten å så dette mediet på er å bruke nålen, som en del av den rene kolonien for å studere blir tatt og settes inn i midten av mediet vertikalt. En enkelt lunge må gjøres. Punkteringen skal ikke nå bunnen av røret, det rette er å dekke bare to tredjeparter.

Det anbefales ikke å gjenta inokulum, siden dette kan bære falske tolkninger av positiv bevegelighet. Det inokulerte mediet inkuberes i aerobiose ved 37 ° C i 24 timer.

Når tiden er over, blir det observert om det var en produksjon av H eller ikke₂S og les bevegeligheten. Til slutt avsløres Indol, og legger til 3 til 4 dråper av Ehrlich eller Kovacs reagens, blandet forsiktig og tolket.

Kilde: Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.

QA

Som sterilitetskontroll blir ett eller to rør uten å inokulere i 37 ° C per 24 timer inkubert. Det forventes at det etter denne tiden ikke er vekst eller fargeendring.

Som kvalitetskontroll kan du bruke sertifiserte kjente stammer, for eksempel: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Sonnei ATCC 29930, Proteus vulgaris ATCC 13315.

De forventede resultatene er: Escherichia coli H₂S negativ, indol og positiv bevegelighet, Enterobacter aerogenes Bare positiv bevegelighet, Salmonella typhimurium H₂S og positiv bevegelighet, med negativ indol. Proteus vulgaris Alt positivt, så lenge som Klebsiella pneumoniae og Shigella Sonnei Alt negativt.

Begrensninger

-Noen belastninger av Morganella Morganii, Blant andre stammer kan produsere et brunaktig pigment i dette mediet på grunn av melaninproduksjon, dette bør ikke forveksles med jernholdig sulfid bunnfall. Hos uerfarne fagfolk kan denne situasjonen generere falske positiver i tolkningen av H -testen₂S.

-Strenge aerobe bakterier vil bare vokse på overflaten av røret, noe som hindrer tolkningen av bevegelighet.

Referanser

1. BD Laboratories. BBL Sim Medum. 2008. Tilgjengelig på: BD.com
2. Neogen Laboratories. Sim Medum. Tilgjengelig på: Foodsafety
3. Difco Francisco Soria Melgizo. Sim Medum. 2009. Tilgjengelig på: http: // f-soria.er
4. Brizuela-Lab Laboratory.  Gjennomsnittlig sim. Tilgjengelig i: .Brizuela-lab.com
5. Britania Laboratories. Gjennomsnittlig sim. 2015. Tilgjengelig på: Studier.Det er/doc
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.