Safranine egenskaper, bruk, teknikker, toksisitet

De Safranine Det er et meriquinoid fargestoff, oppkalt for å ha i sin kjemiske struktur av 2 benzenringer og 2 kvinoidringer, hvor sistnevnte er de som gir den røde fargen.

Det kalles også Safranine eller Basic Red Dimethyl i sin sammendragsform, siden dets vitenskapelige navn er 3,7-diamino-2,8-dimetyl-5-fenyl-fenyl-fenyll_tjueH₁₉N₄ Cl.

Kjemisk struktur av safranin som indikerer benzen- og quinoidringene/ vandige løsning av safranin. Kilde: Neurotoger [Public Domain] Redigert av MSC. Marielsa Gil/LHCHEM [CC BY-SA 3.0 (https: // creativecommons.Org/lisenser/by-SA/3.0)]

Det er en variant som heter Triethyle-Safranine, men det er ingen signifikant forskjell mellom begge stoffene.

Safranine er et monokromatisk fargestoff, og i henhold til egenskapene til den kjemiske formelen er det et positivt ladestoff. Derfor har det tilknytning til negativt belastede strukturer. Disse strukturene vil bli farget rødt.

Denne egenskapen gir anvendbarhet i mange histologiske teknikker for å farge forskjellige cellulære strukturer, både fra eukaryote og prokaryote organismer.

Safranine brukes som et kontrastfargestoff i viktige og velkjente rutinemessige bruksteknikker i bakteriologi. Disse teknikkene er: Gram-Huckers farging, Schaeffer Fulton-farging for sporer eller bakteriekapsler farging, blant andre.

[TOC]

Kjennetegn

Fargen på safran (krydder hentet fra blomsten av blomsten av Crocus sativ) var inspirasjonen til å plassere navnet på dette fargestoffet. Fra begrepet safran kommer navnet på Safranine. Det skyldes den store likheten mellom fargen på safran og fargen som dette fargestoffet gir.

Safranine oppnås som krystaller eller pulver, begge presentasjonene er oppløselige i vann. Safranine fargestoff har ingen lukt. Flekker røde strukturer. Strukturer som tiltrekker Safranine -fargestoffet kalles safranofiler.

Strukturelt sett er Safranine sammensatt, den har to benzenring til endene og i sentrum er de to kvinoidringene plassert der kation n er lokalisert⁺. Senteret i strukturen er systemet som er ansvarlig for å gi farge. Ved denne karakteristikken er dette fargestoffet klassifisert i kategori II.

Bruk

Safranine brukes til å farge forskjellige strukturer. Spesielt fremhever Kulchitskys celler som er til stede i mage -tarmkanalen, også kalt enterocromofines celler.

Det er i stand til å farge mikroorganismer som tilhører familien Rickettsiaceae. På samme måte brukes den i forskjellige teknikker, for eksempel Kosters metode, en modifisert en brukt til farging av kjønnsbakterier Brucella.

På den annen side brukes Safranine i fargingsteknikken til Schaeffer Fulton Spores og i Gram-Huckers farging. I begge teknikker fungerer Safranine som en kontrastfarge.

Kan tjene deg: indisk

I den første tar Spores fargen på det grønne av malakitt, og resten av strukturene er røde av Safranine. I det andre mister gram negative bakterier fargen på det fiolette glasset i misfargingstrinnet, derfor er safraninen den som flekker de gramnegative bakteriene av rødt.

I tillegg brukes Safranine i bakteriologi for å fremstille Brucella Agar med en 1: 5000 Safranine fortynning. Dette mediet tjener til å differensiere arten Brucella Suis av resten av arten. Brucella melitensis og Brucella abortus vokse i dette mediet, men B. Suis Det er hemmet.

I det agroindustrielle feltet har Safranine blitt brukt på 2,25% og fortynnet 1:10 for å fargelegge stamprøver fra sukkerrørplanten.

Denne planten påvirkes ofte av bakterier Leifsonia xyli Subs. Xyli, som skader plantens xilema. Fargede stilker blir evaluert for å bestemme funksjonen til xylem -karene.

Teknikker innen bakteriologi

Castañeda -farging for R -flekkIckettsias

Et blod- eller vevsutstryking plasseres i en bufferløsning (fosfatdemping av pH 7,6). Det har lov til å tørke spontant og deretter dekket med metylenblått i 3 minutter og kontrakt med Safranine. Rickettsias farget blå, i kontrast til den røde bakgrunnen.

Modifisert Koster -farging for Brucella

En utstryking utføres og flamea i lighteren for fiksering. Deretter er den dekket med en blanding av 2 deler mettet vandig safranin med 3 deler KOH 1 mol/l -løsning, i 1 minutt. En vask med destillert vann utføres og 1% fenado metylenblå.

Hvis prøven inneholder kjønnsbakterier Brucella Disse vil bli observert oransje i en blå bakgrunn.

Bakteriekapsler farging

En blanding av bakteriesuspensjon med kinesisk blekk utføres og safranin tilsettes. En rødlig glorie vil bli observert ved mikroskopet rundt hver bakteriekapsel med svart bakgrunn.

Kan tjene deg: rene stoffer

Farging av sporer Schaeffer Fulton

En utvidet med bakteriesuspensjonen utføres. Da er den fast til varme. Det er dekket med 5%malakittgrønn, ofte flameting til utslippet av damper. Prosessen gjentas i 6-10 minutter. Til slutt vaskes den med vann og ansatt med 0,5% Safranine i 30 sekunder. Bacilliene er farget rød og de grønne sporer.

Gram-Hucker-farging

En utvidet med bakteriesuspensjon utføres og fikses til varme. Laminaen med fiolett glass med 1 minutt dekkes. Deretter plasseres Lugol som en mordant løsning per 1 minutt. Deretter er det misfarget med acetonalkohol og til slutt ansatt med Safranine i 30 sekunder.

Gram -positive bakterier er farget blå fiolett og gram negative bakterier av rød.

Noen laboratorier har sluttet å bruke Gram-Hucker-teknikken for å ta i bruk den modifiserte Gram-Kopeloff-teknikken. I sistnevnte erstattes Safranine av grunnleggende fuchsin. Dette er fordi safranin svakt flekker arter av slekter Legionella, Campylobacter og Brucella.

Teknikker i histologiområdet

Kulchitsky cellefarging (enterocromofines)

Vevskuttene i mage -tarmkanalen med sølvklorid er farget. Da er det misfarget med natriumtiosulfat og til slutt ansatt med safranin.

Kulchitsky -celler skiller seg ut fordi de blir presentert med svartbrune granuler.

Farging for påvisning av artrose

Safranine fordi den har en positiv belastning, karboksy og sulfatgrupper av glykosaminoglykaner binder veldig bra. Dette er en del av proteoglykanene som utgjør artikulær brusk. I denne forstand, når farging med Safranine eller, kan det identifiseres om det er tap av brusk eller ikke.

Tap av bruskvev kan måles gjennom Mankin -skalaen eller også kalles slitasjegikt skala.

Teknikken blir deretter forklart: det histologiske snittet blir nedsenket i et brett med Weigerts jernhematoksylinoppløsning, deretter føres det gjennom syre alkohol og vasket med vann.

Fortsett fargingsprosessen ved å fordype arket i raskt grønt, vasker med eddiksyre og nå nedsenking i safranin eller. For å fullføre prosessen er den dehydrert ved hjelp av alkoholer i forskjellige konsentrasjoner i stigende rekkefølge. Det siste trinnet krever at Xileno eller Xilol for prøven skal avklare.

Kan tjene deg: metalloider

Arkene er betinget av Canada Balm eller lignende for å bli observert ved et mikroskop. 

Med denne teknikken er kjernene farget svart, det grønne beinet og brusk der de røde proteoglykanene er funnet.

Tincion for identifisering av makroalgas

Pérez et al. I 2003 foreslo en enkel og økonomisk teknikk for å farge makroalgasene. Prøver utarbeides i histologiske kutt med parafin. Kuttene er satt med 1% glyserin, og lar seg være helt tørre. Deretter plasseres den i xylol for å eliminere parafin.

Kuttet er rehydrert, noe som får det til å passere gjennom en serie brett som inneholder etanol i forskjellige grader av konsentrasjon (synkende rekkefølge), i 2 minutter i hver.

Deretter er den farget i 5 minutter med en 3: 1 -blanding av 1% safranin med 1% toluidinblått, begge fremstilt med 50% etanol. Blandingen tilsettes tre dråper pikrinsyre som fungerer som en mordant.

Så blir det dehydrert igjen gjennom alkoholbrett, men denne gangen stiger opp. Til slutt blir det avklart med Xilol og prøven er utarbeidet med Canada Balm som skal observeres.

Toksisitet

Heldigvis er Safranine et fargestoff som ikke representerer en fare for de som manipulerer det. Det er et uskyldig fargestoff, det er ikke kreftfremkallende og er heller ikke brannfarlig.

I direkte kontakt med huden eller slimhinnene kan det forårsake en liten rødhet i området, uten store komplikasjoner. For dette anbefales det å vaske det berørte området med mye vann.

Referanser

1. Garcia h. Safranine fargestoff eller. Helseteknikk, 2012; 1 (2): 83-85. Tilgjengelig på: Medigrafisk.com
2. Gil m. Gramfarging: fundament, materialer, teknikk og bruk. 2019. Tilgjengelig på: Lofede.com
3. Gil m. Farging av sporer: fundament, teknikker og bruk. 2019. Tilgjengelig på: Lofede.com
4. Safranine."" Wikipedia, gratis leksikon. 7. mars 2017, 10:39 UTC. Siden 2019, 20:49 er.Wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Nyttig fargeleggingsteknikk i den anatomiske tolkningen av Graciliasis tenuifrons og Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Bot Act. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. Tilgjengelig på: Scielo.org.
6. Aleika Church, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Forholdet mellom funksjonaliteten til xylemkarene og tilstedeværelsen av Leifsonia xyli subp. Xyli. Rev. VEG -beskyttelse. 2007; 22 (1): 65-65. Tilgjengelig på: Scielo.Sld