Enkel farging

Hva er enkel farging?

De Enkel farging Det er en rask og enkel fargingsprosedyre der et enkelt fargestoff brukes, så det kalles enkel. Det brukes hovedsakelig til å bestemme morfologien og organiseringen av cellene som er til stede i en prøve.

Naturligvis har cellene ingen farge, så det er nødvendig å synliggjøre dem på noen måte når de blir observert i mikroskopet.

Det er viktig å fremheve at fargestoffene som brukes i enkel farging må være grunnleggende med positiv belastning (kationisk), slik at de spontant kan bli med på vegg- og cellcytoplasma.

Disse cellestrukturene er negativt ladet. Derfor blir fargestoffet, positivt ladet, tiltrukket av cellene og blir med dem spontant. Dermed blir alle celler som er til stede i en prøve raskt farget.

Fargeleggingsfarger i enkel farging

Det er flere grunnleggende fargestoffer som kan brukes i mikrobiologilaboratoriet. De mest brukte er:

• Metylenblått.
• Krystallfiolett.
• Malakittgrønn.
• Grunnleggende fuchsin.

Alle disse fargestoffene fungerer godt i bakterier fordi de har fargeioner (kromoforer) med positiv belastning (kationisk).

Fargetider for de fleste fargestoffer er relativt korte. Generelt varierer de fra 30 sekunder til 2 minutter, avhengig av fargestoffets affinitet.

Det er viktig å huske på at før du forteller en prøve ved enkel farging, må den forlenges og fikses til glassplaten (lysbilde). Den utvidede og faste prøven kalles smøre.

Fremgangsmåte

Trinn 1

Plasser lysbildet på en fargelegging og bruk ønsket fargestoff. Legg igjen den tilsvarende tidsloven.

Normalt tar enkel farging noen sekunder eller et par minutter, avhengig av fargeleggingsfarge.

Observasjon

I dette trinnet er det viktig å ikke overstige den anbefalte tiden for fargestoffet som ble brukt, siden krystaller kan dannes i arket, og produserer det som kalles "gjenstander", som forvrenger cellens morfologi.

Steg 2

Vask sprenget på lysbildet forsiktig med destillert vann fra en flaske, eller med tappevann som strømmer sakte, til avrenningen blir gjennomsiktig. Generelt tar dette 5 til 10 sekunder.

Observasjon

Ikke bruk vannstrøm direkte på lukten, for å forhindre kraften av samme skade.

Hvis det ikke er destillert vann, kan tappevann brukes uten problemer, da det ikke vil påvirke resultatet av farging.

Trinn 3

Tørk lysbildet med absorberende papirhåndklær i en forstand og uten å gni. Forsikre deg om at den nedre delen av lysbildet er ren.

Trinn 4

Observer smøret farget i mikroskopet. Begynn med de fjerneste målene for å finne området du vil observere mer detaljert. Endre målet for å komme nærmere og mer til prøven.

Observasjon

For bruk av målet med den største økningen (normalt 100x) må nedsenkningsoljen brukes, siden dette hjelper lyset til å trenge bedre ut og at bildet ser mer tydelig ut. Det er ikke nødvendig å bruke et deksel.

Trinn 5

Til slutt, kast alle prøver i en passende beholder som er behørig merket som "biologisk risiko".

applikasjoner

• Observasjon av cellemorfologi.
• Observasjon av prøver i kjemiske laboratorier, for å bestemme tilstedeværelsen av bakterier, virus osv.
• Identifiser smittsomme midler og diagnostiser riktig.
• Som et uunnværlig verktøy innen mikrobiologi.
• Å vite om en bakterie har en kapsel eller ikke, og vet hva slags den tilhører.

Referanser

1. Mikrobiologiske applikasjoner: Laboratoriehåndbok i generell mikrobiologi. McGraw-Hill-selskapene.
2. Harisha, s. En introduksjon til praktisk bioteknologi. Media brannmur.