Maismel. Fundament, tilberedning og bruk

Han Maismelagar Det er et solid kulturmedium, lav ernæringsmessig kraft, nyttig for den underkulturelle Candida albicans. På engelsk er det kjent som maismåltid.

Den medium konvensjonelle maismel har en veldig enkel komposisjon, inneholder maismel, agar og vann. På grunn av det lave ernæringsnivået er det ideelt å bruke det i vedlikehold av soppstammer i moderate perioder, spesielt svart sopp.

TIL. Grafisk representasjon av Candida albicans -komplekset i maismel agar. B. Clamidosporas av Candida albicans komplekse utsikt til mikroskopet, dannet i maismel. Kilde: a. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // creativecommons.Org/lisenser/by-SA/3.0)]/ b. Av: CDC/DR. William Kaplan, høflighet: Public Health Image Library.

Kompleks sporulering Candida albicans Det er foretrukket i dette mediet, hvis 1% av Tween 80 blir lagt til under utarbeidelsen av agaren. Clamidospores -formasjon er karakteristisk for denne arten og praktisk talt den eneste som påvirker mennesket.

Det er andre arter som danner muslinger, men det er lite sannsynlig at de påvirker mennesket, for eksempel som Candida australis, til stede i ekskrement av pingviner, eller C. Clausenii, som er en saprofytt som sjelden er funnet. Også eksepsjonelt arten C. Stellatoid og C. Tropicalis De kunne danne dem.

På den annen side favoriserer tilsetning av glukose til middels maismel dannelse av pigmenter i stammer av Trichophytom rubrum.

Det er viktig å fremheve at det er sopp som ikke danner hyfaifer, og heller ikke pseudohifas i anfall maismel, som for eksempel Cryptococcus neoformans, skiller seg fra andre sjangre.

Maismelagar kan tilberede i laboratoriet eller kommersielle medier kan også brukes.

[TOC]

Basis

Maismel er underlag, agar er det størkningsmidlet og vannet er løsningsmidlet.

Maismelagar kan suppleres med Tween 80 (Polyester 80 Sorbitita Monoolate eller Polysorbate). Denne forbindelsen reduserer overflatespenningen i miljøet med sin emulgatorkraft.

Kan tjene deg: fosfatidylinositol: struktur, trening, funksjoner

Det skaper også en fiendtlig atmosfære som hemmer overdrevet cellemultiplikasjon og stimulerer veksten av hyfer, og favoriserer også produksjonen av Clamidospores; Sistnevnte vurderte motstandsstrukturer. Denne strukturen hjelper til med å identifisere arten av arten Candida albicans.

For sin del øker glukose i dette mediet pigmentdannelsesevnen til noen sopp.

Det skal bemerkes at den middels maismel med glukose ikke tjener demonstrasjonen av muslinger i COmplejo Candida albicans.

Forberedelse

Hjemmelaget maismel apar

Vei 47 gr gult maismel og oppløs i 500 ml destillert vann. Varme til 60 ºC, mens preparatet er omrørt i en omtrentlig periode på 1 time. Filtrer deretter gjennom et stykke gasbind og bomull, eventuelt kan det filtreres igjen gjennom et Whatman -filterpapir nr. 2.

Fullfør volumet på 1000 ml med destillert vann. Tilsett 17 gr agarvann, varme for å løse opp. Autoclavar i 15 minutter ved 121 ° C.

Server i petriske sterile plater. Spar i et kjøleskap.

Fargen på det forberedte mediet er hvitaktig med klumpete utseende.

Hvis du vil tilberede maismel med glukose til preparatet beskrevet ovenfor for å tilsette 10 gr glukose.

Kommersiell maismelag

Vei 17 gr av det dehydrerte mediet og oppløs i 1 liter destillert vann. Blandingen kan varmes opp, og omrøres forsiktig for å løse opp helt. Steriliser i autoklav ved 121 ºC, 15 lb, i 15 minutter.

Hell i petriske sterile plater. La stivne. Invester og spar i kjøleskap til bruk. Temperament før du bruker.

PH må være 6,0 ± 0,2 til 25 ºC.

Maismel agar med tween 80

For å overholde ISO 18416 -standarden, må Cornmeal Agar utarbeides som følger:

Kan tjene deg: acetylkoenzym til

Vei 65 gr per liter og tilsett 10 ml Tween 80. Varm og koke i noen minutter til du oppløses, og pass på ikke å overopphetes for mye. Steriliser ved 121 ºC i 15 minutter.

Maismel agar med glukose

For å forbedre den kromogene kraften til koloniene til Trichophyton Rubrum og skille dem fra T. Mentagrophytes, 0,2% glukose til den opprinnelige formelen kan legges til. Det trenger ikke å ha tween 80, siden glukose hemmer dannelsen av muslinger.

Bruk

Hovedsakelig er bruken av maismel -agar ment for studiet av Candida -stammer, og hjelper til med å identifisere seg gjennom den karakteristiske observasjonen av kloidosporer i albicans -arten. Det vil si at bruken av denne agaren fungerer som en hjelpemetode for å identifisere disse gjærene.

I denne agaren kan han utvikle både saprofytiske og patogene arter, men hver former karakteristiske myceliale strukturer. For eksempel produserer ikke arter av slekten Torulopsis mycel og reproduserer bare av Blastoconidia.

På samme måte produserer Trichhosporon og Geotrichum -arter arthroconidia i maismel, og noen ganger er det vanskelig å skille mellom den ene og den andre.

Genotrichums arthroconidia produserer en forlengelse av hyferne som ligner en hockeypinne.

Også pigmentproduksjon ved bruk av glukose -underlagt maismelagar er nyttig i identifiseringen av Trichophytom rubrum.

Sådd

I agartmelmelet. Mediet blir sådd og inkubert ved 22 ºC i 24 til 48 timer. Inkubasjonstid kan forlenges om nødvendig.

Demonstrasjon av Clamidospores

For dette formålet må maismelagaren med tween 80 inokuleres ved hjelp av Dalmau -teknikken. Denne metoden består av å ta med platinahåndtaket en del av den mistenkelige kolonien og lage tre parallelle kutt i midten og holde håndtaket på 45º. Kuttene må skilles i en avstand på 1 cm mellom den ene og den andre.

Kan tjene deg: Flora og Fauna fra Afrika: Representative arter

Deretter er en tidligere flamenet gjenstand over de sådd strekkmerker plassert, slik at den dekkede halvdelen og den andre oppdaget.

Inkuber platene plantet ved 30 ° C i 48-72 timer og undersøk deretter mikroskopet gjennom dekslene.

Vedlikehold av soppstammer

For vedlikehold av stammer plantet plakkene og flommer lagres i kjøleskap (4 til 8 ºC). På denne måten kan de vare flere uker og brukes til undervisnings- eller forskningsformål.

QA

For sterilitetskontroll, en plate uten inokulering ved romtemperatur inkubert, forventes det at det ikke er vekst eller fargeendring.

For kvalitetskontroll kan du så kjente stammer som: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus Niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

De forventede resultatene er delvis hemming for S. aureus og OG. coli. Mens det forventes tilfredsstillende vekst i resten av stammene.

Aspergillus Niger Den vokser med svarte kolonier og sporulert i en omtrentlig tid på 5 dagers inkubasjon.

Candida albicans Levaduriform Colonies with clamidospores produksjon.

Saccharomyces cerevisiae Produser store gjærceller.

Begrensninger

Et gult bunnfall dannes i bunnen av platen som ikke skal forveksles med kolonier.

Referanser

1. Neogen Laboratories. Corn Meal Agar. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen.com.
2. Mikrokitdyrkingsmedier. Corn Meal Agar. Tilgjengelig i: Mediekultur.com.
3. Linares M, Solís F. Guide identifisering av gjær. Tilgjengelig på: http: // www.guide.Jeg vil gjenopplive.
4. Urcia F, Guevara M. Rev. Peru Med.Exp. Folkehelse, 2002; 19 (4): 206-208. Tilgjengelig på: Scielo.com
5. Hushus g. Generell mykologi. 1994.  2. utg. Central University of Venezuela, bibliotekutgaver. Venezuela Caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 Ed. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.
8. Slott e. Sammenlignende studie av noen makro- og mikroskopiske metoder for isolasjon og gjenkjennelse av slekten Candida. Rev. Colombianske farmasøytiske kjemiske vitenskaper. 1970; 3 (1): 33-57. Tilgjengelig i: Sciences.en i.Edu.co