Vogel-Johnson Agar hva er, grunnlag, forberedelse, bruker

Han Vogel-Johnson Agar Det er en solid, selektiv og differensialkultursmidler, spesielt formulert for isolering av Staphylococcus aureus. Dette mediet ble opprettet av Vogel og Johnson i 1960 fra modifiseringen av Telurito Glycina Agar formulert i 1955 av Zebovitz, Evans og Niven.

Modifiseringen besto av å øke konsentrasjonen av manitol som var til stede i miljøet og i inkorporering av en pH -indikator. Den nåværende formelen er sammensatt av Tripteína, gjærekstrakt, mannitol, dipotassiumfosfat, litiumklorid, glycin, fenolrød, agar, 1% kaliumtelurittløsning.

Det skal bemerkes at det er andre medier som, som Vogel-Johnson Agar er selektive for isolering av S. aureus, som Salt Mannitol Agar og Baird Parker Agar. I denne forstand kan det sies at grunnlaget for Vogel - Johnson er enig er en blanding mellom den salte Mannitol Agar og Baird Parker Agar.

I de første koloniene til S. aureus De kjennetegnes ved Fermentol. På den annen side, i den andre S. aureus Det er preget av å redusere Teluro til Teluro og danne grå kolonier til svart. Begge egenskapene blir observert i Vogel-Johnson Agar.

Dette mediet, som dets kolleger, er nyttig for påvisning av Staphylococcus aureus I matprøver, helsekontroller av industriprodukter og i kliniske prøver.

Basis

Næringsbidrag

Vogel - Johnson -mediet inneholder triptein og gjærekstrakt; Begge stoffene gir aminosyrer med lang kjede som fungerer som karbon- og nitrogenkilder som er nødvendige for bakterievekst. Bakteriene som er i stand til å vokse i dette mediet, vil ta næringsstoffene til disse stoffene.

Selektiv kraft

Vogel - Johnson Agar er i stand til å hemme veksten av gramnegative bakterier og til og med noen positive gram, og favoriserer utviklingen av positiv koagulase -stafylokokker. Inhibitorstoffer er kaliumtelluritt, litiumklorid og glycin.

Differensialkraft

Stoffene som gjør dette differensialmediet er mannitol og kaliumfortelling. Manitol er et karbohydrat, og når gjærede syrer produseres som gjør mediet fra rødt til gult, noe som skjer takket være tilstedeværelsen av den røde pH -pH -indikatoren.

Mens den fargeløse teluritten når den reduseres til metallfri Teluro, tar en mørkegrå farge.

Han Staphylococcus aureus fermenter mannitol og reduserer teluro til teluro. Det er grunnen til at de typiske koloniene til S. aureus I dette mediet er de grå eller svarte omgitt av et gult medium.

Bakterier som vokser i dette mediet og ikke reduserer teluritt eller gjæring Mannitol, vil danne gjennomsiktige kolonier omgitt av et rødt medium, enda mer intens enn den opprinnelige fargen, på grunn av alkaliniseringen av mediet ved bruk av peptoner.

På den annen side vil bakteriene som reduserer teluritten, men ikke gjæret, Manitol vil vokse som grå eller svarte kolonier omgitt av et intens rødt medium.

Hvis mediet tilberedt uten tilsetning av kaliumtelling, koloniene til koloniene S. aureus De ville utvikle seg som gule kolonier, omgitt av et gult medium, som skjer i den salte mannitolagaren.

Osmotisk balanse og størkningsagent

Dipotassiumfosfat opprettholder den osmotiske balansen i mediet og justerer pH til nøytralitet 7.2. Mens agaren gir solid konsistens til kulturmediet.

Forberedelse

1% P/V kaliumtelurittløsning

Denne løsningen er ikke inkludert i det dehydrerte miljøet, fordi den ikke kan steriliseres i autoklave. Av denne grunn er det forberedt fra hverandre og lagt til mediet som allerede er sterilisert.

Noen kommersielle hus selger 1% kaliumtelurittløsning klar til bruk. Hvis du vil forberede deg på laboratoriet, fortsett som følger:

Veie 1.0 gr kaliumtelling og måle 100 ml destillert vann. Oppløs kaliumteluritten i en del av vannet og fullfør deretter vannmengden til den når 100 ml. Steriliser løsningen ved filtreringsmetoden.

Vogel-Johnson Agar Base

Vei 60 gr av det dehydrerte mediet, og oppløs i 1 liter destillert vann. Blandingen blir oppvarmet til å koke for å hjelpe den komplette løsningen. Under oppløsningsprosessen er mediet ofte omrørt ofte.

Steriliser i autoklav 15 kilo trykk og 121 ° C i 15 minutter. Fjern fra autoklaven og la stå til mediet når en omtrentlig temperatur på 45 til 50 ° C. Tilsett 20 ml av kaliumtelurittløsningen tidligere utarbeidet til 1%.

Bland og hell på petri sterile plater. La stivne og bestille i en omvendt plate.

Den endelige pH i det fremstilte mediet må være på 7,2 ± 0,2.

Før du så en prøve, må du vente på at platen tar temperaturen i miljøet.

Fargen på det tilberedte mediet er rødt.

Bruk

Selv om det kan brukes til isolering av S. aureus I alle slags prøver brukes det mest til mikrobiologisk analyse av farmasøytiske produkter, kosmetikk og mat.

Det anbefales at inokulen er tett. Såingen kan gjøres ved å stripe med platinahåndtak eller med overflate med Drigalski Spatula.

Platene inkuberes ved 35-37 ° C i 24 til 48 timer i aerobiose.

QA

For å utføre kvalitetskontroll til Vogel-Johnson-miljøet kan du bruke følgende stammerkontroller:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Det forventede resultatet er som følger: for belastningene til S. aureus tilfredsstillende vekst med svarte kolonier omgitt av gult medium. Til S. epidermidis Regelmessig vekst med gjennomsiktig eller svarte kolonier omgitt av rødt medium.

Også, til OG. coli Det forventes at det vil være total hemming, og for Proteus mirabilis delvis eller total hemming; Hvis den vokser, vil den gjøre det knapt og koloniene vil være svart omgitt av rød halvfarge.

Referanser

1. BD Laboratories. VJ (Vogel og Johnson Agar). Tilgjengelig på: BD.com
2. Britania Laboratories. Vogel-Johnson Agar. Tilgjengelig på: Britanialab.com