Peptonada Foundation, forberedelse og bruk

Han PEPTONADA VANN Det er et middel for flytende berikelse, ikke selektiv, hovedsakelig brukt som et fortynningsmiddel av matprøver eller andre materialer. Dette betyr fra det kjemiske synspunktet er veldig enkelt, det inneholder pepton av kjøtt, natriumklorid og vann.

Den har en viss ernæringsmessig verdi, noe som tillater å berike prøven. Hvis det er slått bakterier, har dette mediet makt til å reparere levedyktigheten. Det er spesielt nyttig i utvinningen av bakterier som tilhører enterobacteriaceae -familien.

Peptonada vann i krukker. Kilde: MSc. Marielsa Gil

Når det gjelder utvinning av Salmonellas, anbefales bruk av den buffrede Peptonada -vannvarianten; Dette fungerer som et middel for forkritt av prøven, i dette tilfellet inneholder det andre elementer som dysótisk fosfat og dipotassiumfosfat.

Normalt peptonada vann tilbereder nøytral pH, men det er andre varianter der pH er nødvendig for å være 8,5 ± 0,2 (alkalisk), fordi bakteriene som er ment å isolere er alkalofil Vibrio cholerae.

På den annen side kan dette mediet brukes som basemedium for karbohydratfermenteringstester.

[TOC]

Basis

Peptonas gir næringsstoffene som kreves for bakteriell utvikling, spesielt aminosyrer på nitrogen og kortkjede, mens natriumklorid opprettholder den osmotiske balansen.

I tillegg tillater mediet å spre, homogenisere og reparere bakterieceller som har blitt skadet ved underkastelse til industrielle prosesser.

Siden fortynningsmiddel er ideelt, og effektivt erstatte den fysiologiske løsningen (SSF) eller fosfatdempingsløsningen (PBS).

Bakteriell vekst blir tydelig ved observasjon av turbiditeten til det samme.

Forberedelse

Hjemmelaget (ikke -kommersiell) forberedelse

Vei 1 gr pepton og 8,5 grn natriumklorid, oppløs i 1 liter destillert vann. PH må justeres til 7.0. For dette kan du bruke natriumklorid 1 n.

Kan tjene deg: forbigående avlinger

Forberedelse ved bruk av kommersielt medium

Vei 15 gr dehydrert medium og oppløs i en liter destillert vann. Homogeniser blandingen. Om nødvendig kokes blandingen i 1 minutt for å hjelpe den totale løsningen. Server i 100 ml krukker eller 10 ml rør etter behov. Autoclavar ved 121 ° C i 15 minutter.

Kjølig og bruk i kjøleskap. Den endelige pH i mediet er 7,2 ± 0,2.

Fargen på det dehydrerte mediet er lett og tilberedt beige er klar rav.

Forberedelse for gjæringstester

Til forrige preparat - etter sterilisering - bør karbohydrat tilsettes en endelig 1%konsentrasjon, pluss Andrade -indikatoren (syre fuchsin) eller rød fenol (0.018 g/l). Rørene skal plasseres en Durham Bell for observasjon av gassdannelse.

Andre Peptonada vannvarianter

-Buffret Peptonada vann

Dette inneholder enzymatisk kasein hydrolysert, natriumklorid, dihydrogent fosfat av kalium og hydrogen natriumdodecahydrat natriumfosfat. Den endelige pH er 7,0 ± 0,2.

For å forberede deg, veie 20 gr av det dehydrerte mediet og oppløs i 1 liter destillert vann. La være i omtrent 5 minutter. Varmes med 1 minutt til den er helt oppløst.

Hell over tilstrekkelige krukker i henhold til behovet. Steriliser ved bruk av autoklaven ved 121 ° C i 15 minutter.

-Alkalisk Peptonada vann

Vei 25 gr av det dehydrerte mediet og løses opp i 1 liter vann. Fortsett som beskrevet ovenfor. PH varierer fra 8,3 til 8,7.

Bruk

Inokulumet gjøres ved å plassere prøven direkte.

Det brukes til å fortynne prøvene, spesielt når det mistenkes at det kan være skadede bakterier. Generelt er fortynninger 1:10 og 1: 100.

Kan servere deg: Hvorfor produserer ikke sopp sin egen mat?

Det blir inkubert i 24 timer i aerobiose ved 35-37 ° C.

Avføringsprøver

For avføringsprøver på jakt etter Salmonella anbefales bruk av buffret eller bufret vann som et middel til pre-enrique.

For å gjøre dette, fortsett som følger:

Hvis avføringen dannes for å ta 1 gr -prøve. Hvis de er væske, ta 1 ml avføring og suspenderer i et rør med 10 ml bufret Peptonada -vann. Når det.

I alle tilfeller, bland og homogeniser prøven veldig bra.

Inkuber ved 37 ° C i 18 til 24 timer. Deretter underkulturell i en berikelsesbuljong som en selenitobuljong cystin eller tetasjonsbuljong ved 37 ° C i 18-24 timer mer. Endelig vokse i selektive medier for Salmonella, som Agar SS, Agar XLD, Hektoen Agar, blant andre.

Matprøver

Peptonada-vann brukes som et berikelsesmiddel eller som et enkelt fortynningsmiddel, men hvis arter av Salmonella blir søkt, brukes det som et middel til pre-Enrique, som allerede beskrevet.

I mat, fortsett som følger:

For fast mat angrer 25 gr av prøven og for flytende mat, må du måle 25 ml av det samme. Plasser denne delen i krukker som inneholder 225 ml Peptonada -vann. Bland og homogeniser prøven.

Hvis det mistenkes at den mikrobielle belastningen er høy, kan serielle eller desimale fortynninger utføres for å lette antall kolonier som danner enheter (UFC).

Antall fortynninger vil avhenge av typen prøve og analytisk opplevelse.

Hvis det tvert imot mistenkes at den mikrobielle belastningen er veldig lav, er det ikke nødvendig å utføre fortynninger. Deretter er subjektivt i selektive medier.

Kan tjene deg: katalase: egenskaper, struktur, funksjoner, patologier

Når det gjelder mat fra havet, som sjømat, fisk, blant annet, på jakt etter Vibrio cholerae eller andre arter av Vibrio, Peptonada vann som er justert til pH 8,5 (alkalisk Peptonada -vann) skal brukes (alkalisk peptonada).

QA

Fra hvert tilberedt må man inkubere to rør uten å inokulere i 24 timer i aerobiose ved 37 ° C. Tid er over, turbiditet eller fargeendring skal ikke observeres.

Kjente kontroller kan også brukes til å evaluere effektiviteten:

For dette kan du bruke følgende bakteriestammer: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076.

I alle tilfeller forventes en tilfredsstillende mikrobiell utvikling, som blir observert av turbiditeten i miljøet.

Begrensninger

-Det dehydrerte mediet er veldig hygroskopisk, så det må holdes borte fra fuktighet.

-Mediet skal ikke brukes hvis noen form for forverring blir observert.

-Det dehydrerte kulturmediet skal holdes mellom 10 - 35 ° C

-Det tilberedte mediet må holdes nedkjølt (2-8 ° C).

Referanser

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B og Velázquez eller. Teknikker for matmikrobiologisk analyse. 2009, 2. utg. Fakultet for kjemi, UNAM. Mexico. Versjon for manuell og dokumenter administrator (AMYD) ved Fakultet for kjemi, UNAM 1. Tilgjengelig på: http: // depa.Fquim.Unam.MX
2. Britania Laboratories. Buffret Peptonada vann. 2015. Tilgjengelig på: Britanialab.com
3. Neogen Laboratories. PEPTONADA VANN. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen.com
4. Britania Laboratories. PEPTONADA VANN. 2015. Tilgjengelig på: Britanialab.com
5. Merck Laboratories. Peptonada bufret vann. Tilgjengelig på: Merckmillipore.com
6. Conda Pronadisa Laboratories. Alkalisk Peptonada vann. Tilgjengelig på: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 Ed. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.