Tripticaseína soyabuljong hva er, fundament, forberedelse, bruk

Han Tripticaseína soyabuljong Det er et flytende kulturmedium, veldig næringsrikt og ikke selektivt. På grunn av sin store allsidighet er det et av de mest brukte flytende kulturmediene i mikrobiologilaboratoriet.

Det er også kjent under navnet Triptic Soy Soy Tryptisk jeg er Buljong eller CST). Bruken er veldig varierte på grunn av deres sammensetning. Det er sammensatt av triptein, pepton av soyabønner, natriumklorid, dipotassium og glukosefosfat.

Soya soya tripticaseína sådd med en stamme av Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 hvor pigmentproduksjon er observert. Kilde: Foto tatt av MSc -forfatteren. Marielsa Gil.

Det er i stand til å reprodusere klinisk viktige patogene bakterier, inkludert de som krever av ernæringsmessig synspunkt og anaerobe bakterier. Noen opportunistiske og forurensende sopp kan også utvikle seg i dette mediet.

På grunn av sin høye ernæringskraft har den høy følsomhet for å oppdage mikrobiell forurensning, av denne grunn ble den valgt av USDA Animal and Plant Health Inspection Service for den mikrobiologiske analysen av vaksiner.

På samme måte oppfyller Tripticaseína soyabuljong kravene til de forskjellige farmakopoerne (European EP, japansk JP og North American USP) for den mikrobiologiske studien av produkter på industrielt nivå, for eksempel kosmetikk og mat.

På den annen side er det verdt å nevne at til tross for dets store bruk er dette mediet relativt økonomisk, så det er rimelig for de fleste mikrobiologilaboratorier. I tillegg er det veldig enkelt å forberede.

Basis

Tripteine, pepton og glukose gir viktige ernæringsegenskaper for å gjøre det til et ideelt medium for rask mikrobiell utvikling.

Kan tjene deg: Linnean taksonomi av levende vesener

Omtrent 6 til 8 timers inkubasjon kan du allerede sette pris på vekst i de fleste mikroorganismer. Imidlertid er det langsomme vekststammer som kan vare i dagene for å vokse.

Natriumklorid og dipotasisk fosfat fungerer som en osmotisk og pH -regulator likevekt henholdsvis. Tilstedeværelsen av vekst fremgår av utseendet av turbiditet i midten; Hvis det ikke er noen vekst, forblir mediet gjennomsiktig.

På grunn av sin lysfarge er det mulig å observere produksjonen av pigmenter, for eksempel den som er vist på bildet som ligger i begynnelsen av artikkelen, som tilsvarer pigmentet produsert av Pseudomonas aeruginosa. 

Forberedelse

-Tripticaseína soyabuljong

For å tilberede triptyk soyabuljong, må 30 gr dehydrert kommersielt medium veies i en digital balanse. Oppløses deretter i en liter destillert vann som er inneholdt i en fixola.

Blandingen blir liggende i ro i 5 minutter og tar deretter en varmekilde for å hjelpe mediumoppløsningen. Det må opprøres ofte mens du koker per 1 minutt.

Når den er oppløst, er den distribuert i rør av passende størrelse etter behov. Du kan bruke rør med bomullshette eller Baquelita Tapas. Deretter steriliseres rørene i autoklaven ved 121 ° C i 15 minutter.

Medium pH må være 7,3 ± 0,2

Det bør tas i betraktning at fargen på den dehydrerte kulturen er beige klar og skal lagres mellom 10 til 35 ° C, på et tørt sted. Mens den tilberedte buljongen er lett rav og må lagres i kjøleskap (2 til 8 ° C).

-Tripticaseína soyabuljonsvarianter

Modifisert tripticasein soya buljong kan fremstilles ved å tilsette gallesalter og novobiocin for å gjøre det selektivt for isolering av OG. coli. Et annet alternativ for samme formål er å tilberede soyabulsen supplert med vankomycin, cephixime og telurito (2,5 ug/ml).

Kan tjene deg: 25 eksempler på aseksuell reproduksjon

På den annen side kan mer glukose (0,25%) tilsettes tripticaseína soyabuljong når målet er å stimulere dannelsen av biofilmer.

Bruk

Det er næringsrikt nok til å tillate vekst av krevende eller irriterende bakterier som som Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp og Brucella sp, Ingen grunn til å supplere med blod eller serum.

På samme måte kan noen sopp utvikle seg i denne buljongen, for eksempel Candida albicans Complex, Aspergillus sp og Histoplasma capsulatum.

I tillegg er dette mediet under anaerobe forhold ideelt for å utvinne bakterier som tilhører kjønnsklærstridium, så vel som anaerobe bakterier som ikke er sporulert av klinisk betydning.

Hvis 6,5% natriumklorid tilsettes, kan det brukes til vekst av enterococcus og andre streptokokker i gruppe D.

På forskningsnivå har det vært veldig nyttig i forskjellige protokoller, spesielt i studiet av biofilmer eller biofilmer som danner bakterier. Det brukes også til å fremstille 0,5% Mac Farland -bakteriesuspensjonen som er nødvendig for å utføre antibiogrammet ved Kirby og Bauer -metoden.

I dette tilfellet blir 3 til 5 kolonier av lignende utseende tatt og emulgerte i 4-5 ml soya SOA-tripticasein. Deretter blir den inkubert i 2 til 6 timer ved 35-37 ° C og passer deretter den ønskede konsentrasjonen ved bruk av steril saltoppløsning. Tripticasein soya våkner ikke skal brukes fra 18 til 24 timers inkubasjon.

Sådd

Prøven kan sås direkte eller rene kolonier hentet fra selektive midler kan bli utsatt for. Inokulatet må være liten for ikke å skye mediet før inkubasjon.

Normalt inkuberes det ved 37 ° C i aerobiose i 24 timer, men disse forholdene kan variere avhengig av mikroorganismen som er søkt. Det kan også inkuberes under anaerobioseforhold ved 37 ° C i flere dager om nødvendig. For eksempel når det gjelder krevende mikroorganismer eller langsom vekst, kan den inkuberes i opptil 7 dager.

Kan tjene deg: Dextrose Potato Agar: Foundation, Preparation and Use

I den mikrobiologiske analysen av farmasøytiske stoffer - som vaksiner - er protokoller strengere. I disse tilfellene utelukkes ikke buljongen uten vekst før den oppfyller 14 dager med kontinuerlig inkubasjon.

QA

Fra hvert forberedt parti skal 1 eller 2 rør inkuberes for å demonstrere dets sterilitet. Må forbli uten endring.

Du kan også så kjente stammer for å evaluere atferden din. Blant belastningene som kan brukes er:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 eller 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

I alle tilfeller må veksten være tilfredsstillende under atmosfæreforholdene og tilstrekkelig temperatur for hver mikroorganisme.

Begrensninger

-Glukosefermentering forårsaker nedstigningen av medium pH ved syreproduksjon. Dette kan være ugunstig for å overleve en viss surhetsfølsomme mikroorganismer.

-Det anbefales ikke for opprettholdelse av stammer, for i tillegg til surhet, bakterier etter noen dager eksosnæringsstoffer med den påfølgende akkumulering av giftige stoffer som gjør det ugjestmilde miljøet.

-Du må jobbe med å ta vare på alle sterilitetsprotokoller, siden buljongene lett kan forurenses.

-Etter å ha tilberedt tripticasein soyabuljonger, bør det ikke prøves å overføre buljong for et annet sterilt rør, fordi denne typen manøvrer er veldig sårbar for forurensning.

Referanser

1. Britania Laboratory. Tripteine ​​soyabuljong. Tilgjengelig på: Britanialab.com
2. MCD Laboratory. Tripticaseína soyabuljong. Tilgjengelig på: elektroniske systemer.com
3. Neogen Laboratory.  Triptych soyabuljong. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen.com