Half Stuart Foundation, forberedelse og bruk

Han Halvstuart Det er en semi -solid agar eller en buljong uten næringsstoffer, brukt til transport av biologiske prøver. Hensikten er å holde stammene til stede i prøven levedyktig i en viss tid, men uten å øke den mikrobielle populasjonen.

Det ble opprettet av Moffet, Young og Stuart i 1948 og deretter endret av Toshach og Patsula. Det er sammensatt av natriumglyceofosfat, natrium tioglycoate, kalsiumklorid og agar-tilsetning. Sistnevnte er til stede i det semi -solide og fraværende mediet i væsken. Noen laboratorier tilfører metylenblå.

Kulturett med Stuart -transport. Kilde: av: CDC/DR. Gilda Jones, høflighet: Public Health Image Library

De brukes vanligvis når det ikke er mulig å så prøven umiddelbart. I dette tilfellet plasseres prøven i transportmidlene, mens den overføres til laboratoriet som vil behandle avlingen.

På denne måten er det garantert at mikroorganismer som er til stede forblir i live til de er inokulert i de tilsvarende kulturmediene.

Opprinnelig var bruken bestemt til å transportere urinrørs- eller vaginale prøver der tilstedeværelsen av Neisseria gonorrhoeae. Deretter innså de at nytten deres kunne være bredere.

Stuart -mediet viste seg å være veldig effektivt i bevaring av labile og irriterende mikroorganismer som som Neisseria meningitidis, influensa, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium difteriae, Bordetella Pertusis, blant andre. I tillegg til andre ikke -annoying mikroorganismer som enterobakterier.

Stuart -mediet unngår i utgangspunktet uttørking av prøven, opprettholder den osmotiske balansen og beholder mikroorganismer til en ideell pH. På den annen side, strategisk inneholder dette mediet ikke næringsstoffer, dette forhindrer at mikroorganismer multipliserer.

I markedet er det spesielle show for transport av prøver som inneholder denne eller andre transportmidler, kalt Culturette. De kan også utarbeides i laboratoriet.

[TOC]

Basis

Slutten på Stuart -transportmiddelet er å holde prøvene nærmest sin opprinnelige tilstand, til den er behandlet.

Natriumglyceofosfat og kalsiumklorid er et buffersystem som virker ved å opprettholde pH og osmolaritet.

Mens natrium tioglycate fungerer som et reduksjonsmiddel og i tilfelle av å inneholde dette gir det den semi -solide konsistensen, for å utsette oksygenering av miljøet. Endelig er metylenblått en oksidasjonsindikator, det vil si at den oppdager tilstedeværelsen av oksygen.

Kan tjene deg: glykosaminoglicanos: egenskaper og funksjoner

Det halvfolide mediet med redoksindikator er ideelt for transport av prøver der tilstedeværelsen av anaerobe bakterier er mistenkt.

Kjennetegn på transportmidlene

Stuart -mediet, som alle transportmidler, oppfyller visse egenskaper, inkludert:

-Opprettholde levedyktige de mikrobielle stammene som er til stede uten å multiplisere.

-Den inneholder ikke næringsstoffer; Forbindelsene er rettet mot å holde prøven hydrert, under tilstrekkelige pH og osmolaritet.

-Hemmer autolyzed av noen delikate mikroorganismer, for eksempel pneumococcus.

-Bruken er midlertidig, den skal ikke utvides for mye.

Forberedelse

Halv semi-solid stuart med redoksindikator

Hjemmelaget forberedelse

Ingredienser

Natriumglyceofosfat 10 gr

Natrium tioglycoate 1.0 gr

Kalsiumklorid 0.1 gr

Metylenblått 0.002 gr

Agar -Agar 3 Gr

Destillert vann 1 l

Bland komponentene og varm opp til total løsning. Hell i rør eller spesielle escobillones. De blir introdusert i autoklaven og sterilisert ved 121 ºC i 15 minutter. La rørene avkjøles vertikalt (i form av en taco). Rom ved romtemperatur.

Forberedelse med kommersielt medium

Vei 14,1 gr av mediet i 1 liter destillert vann. Varme ofte omrøring til den totale oppløsningen, kan du la den koke. Resten av prosedyren som allerede beskrevet.

Det dehydrerte mediet er krem ​​og tilberedt må være blå på overflaten. Dette skyldes tilstedeværelsen av metylenblått.

PH i mediet må justeres til 7,4 ± 0,2

Halv modifisert flytende Stuart (hjemmelaget forberedelse)

Ingredienser

Natriumglyceofosfat 10 gr

Natrium tioglycoate 1 gr

Kalsiumklorid dihydrert 0,1 gr

1000 ml destillert vann

Den bærer de samme ingrediensene som halvfolid, men den har ikke agar eller metylenblå. I dette tilfellet blandes komponentene uten oppvarming og 0,5 ml distribueres i 16 x 125 mm rør med et trådlokk.

Det steriliserer i autoklav ved 121 ° C i 10 minutter. For prøve ta -sam.

Kan tjene deg: Matematisk biologi: Historie, studieobjekt, applikasjoner

Rørene lagres ved romtemperatur.

applikasjoner

Kommersielt er det spesielle enheter for transport av prøver kalt Culturette; Denne enheten er et langstrakt og tynt rør som bringer en vattpinne inni og til slutt er det et segment som inneholder halvsolid eller flytende Stuart -medium.

Enheten åpnes og med vattpinnen tar prøven. Deretter introduseres det igjen i røret til spissen av vattpinnen er satt inn i mediet til semi-solid transport; Noen bringer en polyuretan -svamp impregnert med flytende Stuart -medium, som prøven er bevart når den holder seg våt.

I tilfelle at tilstedeværelsen av delikate mikroorganismer mistenkes, bør bomullsbaoks med kull i prøve brukes.

Prøvene som kan tas med vattpinner eller kvast og overføres i dette mediet er svelgseksudater, rektale vattpinner og forskjellige sekresjon.

Under overføringen av prøven i transportmidlene til laboratoriet, bør innlevering av miljøet til ekstreme miljøforhold (veldig kaldt eller veldig varme) unngås (veldig kald eller veldig varme). Plutselige endringer i atmosfæretrykk bør også unngås.

Tiden der mediet er i stand til å holde en mikroorganisme levedyktig vil avhenge av den aktuelle belastningen. For for eksempel kan mikroorganismer av slekten Neisserias og Haemophilus opprettholdes levedyktig i opptil 24 timer, men stammer som Salmonella eller Shigella kan vare i dagene og inntil uker.

Hvis det anslås at prøvebehandling kan ta mer enn 4 dager, er det å foretrekke å fryse prøven ved -70 ° C.

Prøveidentifikasjon i transportmidler

De forberedte transportmediene eller den kommersielle kulturen må ha en etikett der følgende data skal plasseres:

Navn og etternavn på pasienten: Unngå prøvetaking av forvirring.

Identifikasjonsnummer: Det er praktisk å bringe en ordre på jobben.

Prøve kilde: Hjelp bakteriologen med valg av passende kulturmedier.

Kan tjene deg: Kapselfarging: Foundation and Techniques

Behandler lege: Noen ganger er det nødvendig for mulige konsultasjoner.

Dato og tid for prøven: Det er nødvendig for aksept eller avvisning av prøven i henhold til tiden som går mellom prøven og mottakelsen i laboratoriet.

Annen informasjon som vil være veldig nyttig for anneks er:

Den presumptive diagnosen: Guide i tillegg av spesialkulturmedier i henhold til diagnostisk mistanke.

Antibiotikabehandling: Det er nyttig å festes til antibiogrammet.

All denne informasjonen er viktig for å garantere god behandling av prøven.

QA

For å evaluere driften av Stuart -mediet, kan du inokulere kjente og opprettholde stammer ved 25 ° C, for eksempel: Bordetella kikhoste ATCC 9340, influensa ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

I alle tilfeller forventes det å gjenvinne den aktuelle mikroorganismen, bevart i 24 timer.

På den annen side er andre stammer som: Shigella Flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 og Escherichia coli ATCC 11775.

I alle tilfeller forventes det en rikelig utvinning i opptil 96 timer.

Begrensninger

Noen studier sikrer at glyceofosfat som er til stede i medium Stuart kan metaboliseres av noen koliformer, blant andre gramnegative bakterier og derfor multipliseres i dette mediet.

Denne risikoen øker jo mer behandlingen av prøven er forsinket. På samme måte påvirker utstillingen av Stuart -mediet ved høye temperaturer under overføringen denne spesielle.

Referanser

1. “Midt i transport (mikrobiologi)."" Wikipedia, gratis leksikon. 13. april 2018, 10:36 UTC. 1. april 2019. Tilgjengelig på: dette.Wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Kulturmedier. Stuart transportmedium. Tilgjengelig på: Tilgjengelig i: Kulturmedier.com
3. Lablisan. Stuart transportmedium. Tilgjengelig på: Lablinsan.Cl
4. Vitenskapelig MDM. Fordelene med å ha gjennomsnittlig mikrobiologisk transportstuart. Tilgjengelig på: mdmcientify.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Tilgjengelig på: metrixlab.MX
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 Ed. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.