Agar XLD Foundation, forberedelse og bruk

Han XLD Agar o acho xilosa lysine desoxicate er en selektiv og differensiell fast kultur for enteropatogen isolasjon. Taylor designet XL Agar -formelen (xylose, lysin) for å forbedre isolasjonen av Shigella -slekten.

Han bemerket at denne sjangeren ble hemmet i de fleste medier som er bestemt til enteropatogenisolasjon. Deretter ble han tilsatt natriumdexikolat, natriumtiosulfat og jern amonisk sitrat for å øke selektiviteten. Denne formelen har vist seg å være nyttig for både Shigella og Salmonella -isolasjon.

Forskjeller fra koloniene til Shigella, Salmonella og coliforms i Agar XLD. TIL. Shigella sp, B. Salmonella sp, c. Coliforms. Kilder: a. Av: CDC/ Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, høflighet: Public Health Image Library B. https: // last opp.Wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/salmonella_species_growing_on_xld_agar _-_ show_h2s_produksjon _-_ Detalj.Jpg c. Av: CDC/DR. J. J. Farmer, høflighet: Public Health Image Library

XLD -agaren er sammensatt av gjærekstrakt, natrium, xylose, lysin, laktose, sukrose, natriumtiosulfat, jern ammoniumcitrat, natriumklorid, rød fenol og agar og agar. I de fleste bakteriologilaboratorier brukes Agar XLD og SS Agar -duoen til studiet av fekale prøver på jakt etter Shigella og Salmonella.

Andre laboratorier foretrekker kombinasjonen av Chromagar Salmonella og Agar XLD, blant andre tilgjengelige alternativer. Disse duoene kan utarbeides i doble petrieplater. På den ene siden plasserer de agar xld og på motsatt side det andre mediet valgt.

[TOC]

Basis

-Ernæringskraft

XLD -agaren har gjærekstraktet, som fungerer som en kilde til næringsstoffer til mikroorganismer som utvikler seg i denne agaren. I tillegg gir tilstedeværelsen av karbohydrater (xylose, sukrose og laktose) energi til bakteriene som kan gjære dem.

-Medium selektivitet

Som et hemmende stoff presenterer det natriumoppsett; Dette forhindrer veksten av gram positive bakterier, og gir medium selektiv karakter.

-Differensialkraft

Typiske Shigella -kolonier

Som allerede nevnt inneholder XLD -agaren xylose; Dette karbohydratet er gjæret av alle bakterier som vokser i dette mediet bortsett fra slekten Shigella.

Kan tjene deg: Hardy-Weinberg Law

Dette er en av egenskapene som dens differensielle karakter tilbyr, siden Shigellas kolonier skiller resten ved å utvikle røde kolonier, mens de andre bakteriene produserer gule kolonier.

Typiske kolonier av Salmonella

Kjønnssalmonellaen gjærer også xylose, og genererer først gule kolonier. Etter å ha uttømt xylose -karbohydratet, angriper imidlertid lysin ved enzymlysin -dekarboksylase. Lysin -dekarboksylering genererer alkalier som gjør fargen på kolonien og den originale røde til den originale røde.

Denne oppførselen utføres bare av Salmonella, siden coliformene som dekarboksyle. Dette er fordi coliforms også gjærer laktose og sukrose til stede; Derfor er syreproduksjonen veldig høy, og etterlater den gule kolonien i disse bakteriene.

Det skal bemerkes at kjønnssalmonellaen ikke gjærer sukrose, og heller ikke laktose.

H₂S

XLD -agaren tillater også å oppdage arten av Salmonella -produsenter av H₂S; For å gjøre dette har den sulfidkilden representert med natriumtiosulfat og en reaksjonsutvikler som er jern ammoniumcitrat.

Sistnevnte reagerer med H₂S (fargeløs gass) og danner et synlig svart bunnfall uoppløselig jernsulfat. I denne forstand vil egenskapene til Salmonellas kolonier være røde med et svart senter.

Det skal bemerkes at for reaksjonen av h₂S, en alkalisk pH er nødvendig. Det er grunnen til at andre enterobakterier som danner h₂De kan ikke gjøre det eller gjøre det dårlig i dette miljøet, siden den høye surheten de produserer når de gjærer karbohydrater som er til stede, hemmer eller hindrer reaksjonen.

-Natriumklorid, agar og fenolrød

Til slutt opprettholder natriumklorid den osmotiske balansen; Agaren er det størkende middelet og det røde av fenol oppdager endringene av pH, og snur fargen på koloniene og mediet.

Forberedelse

Vei 55 gr XLD dehydrert og oppløs i 1 liter vann. Varm og rist blandingen til den når kokepunktet. Ikke overopphetes, siden varme skader mediet og skaper et bunnfall som endrer morfologien til de typiske koloniene.

Kan tjene deg: proteoglykaner

Dette mediet skal ikke autoklaveres. Når du oppløses, må du passere til et bad fra 50 ° C. Når avkjøling skal serveres direkte på petriske sterile plater. De kan dusjes i enkle plater eller doble plater. De har lov til å stivne og oppbevare i kjøleskapet til bruk.

Temperament før du bruker. Som et ikke -ssterilisert medium, anbefales det å forberede det nær bruksdatoen.

Den endelige pH i mediet må være på 7,4 ± 0,2. Fargen på det forberedte er oransje rød, gjennomsiktig, uten bunnfall.

Hvis det er en lysin xylose agar (XL), kan natrium, natrium tiosulfat og amonisk jerncitrat tilsettes. På denne måten oppnås XLD Agar -formelen.

applikasjoner

XLD -agaren brukes til utvinning av enteropatogener, hovedsakelig av Shigella -slekten og sekundært av kjønn Salmonella. Det er nyttig for å evaluere avføring, vann og matprøver.

Typer prøver

Krakk

Avføringsprøvene kan såveres direkte i XLD -agaren, og gir en god fordeling av materialet for å oppnå isolerte kolonier.

For å forbedre utvinningen av Salmonella, kan XLD enig av berikelsesmidler for Salmonella sås en.

Mat

Når det gjelder mat, kan berikelsesbuljonger brukes til Salmonella og Shigella. For salmonella kan du bruke selenito buljong cystin, lysegrønn tetrasjonsbuljong, blant andre.

Når det.

Vann

I vannanalyse anbefales membranfiltreringsteknikken og bruken av XLD -agar, blant andre.

Sådd og identifikasjonsforhold

Sodket medium blir inkubert i aerobiose ved 35 ° C i 24 til 48 timer.

Det kan tjene deg: flora og fauna i India

De typiske koloniene i hver sjanger blir observert, de mistenkelige koloniene bør utføres biokjemiske tester for identifisering.

QA

For å evaluere den middels kvalitetskontroll, kan følgende bakteriestammer brukes: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Abony DSM 4224, Shigella Flexneri ATCC 12022, Shigella Sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Salmonella -slekten er preget av å presentere i dette medium røde koloniene med svart sentrum eller helt svarte kolonier. Mens, i Shigella -slekten, må koloniene være røde, det vil si fargen på mediet.

I tilfelle av Escherichia coli Det forventes å bli helt eller delvis hemmet; Hvis koloniene vokser er gule. Til Proteus mirabilis Knapt vekst forventes med rosa kolonier med eller uten svart senter. Endelig vil slekten Klebsiella vokse som gule kolonier.

Endelige hensyn

XLD -agaren brukes veldig i bakteriologilaboratorier for sin høye effektivitet for utvinning av Shigella og har også en god utvinning av Salmonella -slekten.

Rall og samarbeidspartnere (2005) i sitt arbeid med tittelen "Evaluering av tre berikelsesbuljonger og fem solide medier for påvisning av Salmonella i fjærkre" viste det av de 3 klassiske mediene som er bevist (Bright Green Agar, SS Agar og Agar XLD), Agar XLD oppnådd den beste gjenopprettingsgraden.

Gjenopprettingsprosentene var følgende: 13.8% for lysegrønn agar, 27.6% for SS, og 34.5% for XLD. Det ble bare overgått av kromogene medier Agar Rambach med 48% utvinning og kromagar med 79.3%.

Referanser

1. Matoverførte sykdommer. Shigellosis. Tilgjengelig på: Anmat.Gov.ar
2. “Agar XLD."" Wikipedia, gratis leksikon. 9. februar 2019, 11:46 UTC. 10. april 2019, 19:25 Wikipedia.org
3. BBL Laboratories. Chromagar Salmonella / BD XLD Agar (Bipacca).2013 tilgjengelig på: BD.com
4. Lab. Neogen. XLD Agar. Tilgjengelig på: Foodsafety.Neogen
5. Francisco Soria Melgizo Laboratory. XLD Agar. Tilgjengelig på: http: // f-soria.Det er/informere
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Evaluering av tre berikende Bruths og fem platemedier for Salmonella -deteksjon i fjærkre. Braz. J. Mikrobiol.  2005; 36 (2): 147-150. Tilgjengelig fra: Scielo.Br
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 Ed. Pan -American redaksjon S.TIL. Argentina.